SITE INTERNET de DIAGNOSTIC DES AVORTEMENTS BOVINS
Examen bactรฉriologique
Le diagnostic se fait par isolement et identification du germe ร partir de tissus foetaux ou du placenta. Prรฉlรจvement de choix : lโavorton (recherche dans le foie, les poumons, le contenu abomasal et le cerveau, avec culture sur milieu usuel) ; le placenta, souvent souillรฉ par des germes telluriques ne constitue que la solution secondaire. Lors dโimpossibilitรฉ de diagnostic post-mortem ร partir de lโanimal, cet examen peut รชtre rรฉalisรฉ ร partir de lโensilage. Des cultures sur milieu usuel, sans nรฉcessitรฉ dโenrichissement, sont utilisรฉ (gรฉlose nutritive, trypticase-sojaโฆ) ; lโisolement requiert une gรฉlose nutritive ou une gรฉlose de Columbia : en 24 heures sont obtenues de fines colonies translucides, qui prennent une coloration bleutรฉe en translumination oblique ; dans le cas dโune gรฉlose au sang, sont relevรฉes des zones รฉtroites et diffuses dโhรฉmolyse ฮฑ et ฮฒ en 24 ร 48 heures. Lโidentification de la bactรฉrie utilise des techniques classiques se basant sur les caractรฉristiques du germe (catalase+, glucose+โฆ).
Dans le cas de cette bactรฉrie, la coloration diffรฉrentielle nโa que peu dโintรฉrรชt. Lโรฉtude antigรฉnique nโest rรฉalisรฉe que dans des laboratoires spรฉcialisรฉs possรฉdant les sรฉrums de rรฉfรฉrence. Le pouvoir pathogรจne de la listรฉria isolรฉe est apprรฉciable par diverses expรฉriences (instillation conjonctivale au cobaye, inoculation intra-pรฉritonรฉale ร la souris).
Tests sรฉrologiques
Ils sont principalement utilisรฉs sur un รฉchantillon vaste de sรฉrum plus que sur des รฉchantillons individuels. En raison de la variabilitรฉ individuelle, il est nรฉcessaire de tester au moins 10 animaux ou 10% du cheptel pour obtenir des informations valables. Frรฉquemment les vaches ayant avortรฉ de leptospirose ont des taux sรฉrologiques bas. Un diagnostic tardif dโavortement ร L. pomona est obtenu quand la majoritรฉ des animaux ont des taux de 1/1000 ou plus. Si le taux sรฉrologique dโau moins 1/1000 est relevรฉ sur une vache rรฉcemment avortรฉe (dans le cas de lโimplication de L. hardjo), la probabilitรฉ que le foetus ait รฉtรฉ infectรฉ sโรฉlรจve ร 80 % ; mais il faut rester prudent, car 39 prรจs dโun tiers des vaches ayant avortรฉ et possรฉdant des titres sรฉrologiques bas (< 1/100) ont eu des foetus infectรฉs. De plus, il est inutile dโรฉtudier une cinรฉtique sรฉrologique sur une vache venant dโavorter, car soit les taux restent constants, soit ils chutent.
Dans le cas dโavortements ร Leptospires, les animaux qui avortent sont ceux dont le taux dโanticorps est le plus bas. (sรฉronรฉgatif ou faiblement sรฉropositif) Le test de micro-agglutination (M.A.T) (test de rรฉfรฉrence) permet de dรฉtecter les immunoglobulines circulantes (IgG et IgM) spรฉcifiques des leptospires. Il doit inclure tous les sรฉrogroupes prรฉsents sur le territoire oรน a eu lieu lโavortement. Il peut รชtre utilisรฉ en diagnostic individuel sur sรฉrum foetal, chez qui il est spรฉcifique mais peu sensible (le foetus nโayant pas forcรฉment pu secrรฉter dโanticorps avant de mourir) ou collectif sur sรฉrums de 10 % des vaches, ou ร dรฉfaut de 10 vaches). La fixation du complรฉment peut รฉgalement รชtre employรฉe. Le diagnostic de certitude est obtenu ร partir de la mise en รฉvidence de leptospires ou dโanticorps spรฉcifiques sur lโavorton. Une forte suspicion dโinfection dโun troupeau peut รชtre obtenue par sondage sรฉrologique portant sur Leptospira hardjo et Leptospira pomona.
Examens complรฉmentaires
Le diagnostic direct est difficile mais nรฉcessaire : un avortement ne peut รชtre attribuรฉ avec certitude ร cette maladie que si des lรฉsions histologiques sont observรฉes, associรฉes ร lโisolement et ร lโidentification dโune espรจce pathogรจne. La culture du germe nรฉcessite un milieu particulier et une atmosphรจre enrichie en dioxyde de carbone. Lโidentification prรฉcise de la bactรฉrie isolรฉe est nรฉcessaire car de nombreux Campylobacter ne sont pas pathogรจnes. Les laboratoires mettent en place des colorations diffรฉrentielles ou de simples colorations Gram surcolorรฉes ร la fuschine (coloration de Vago) ร partir du contenu gastrique. Des bacilles incurvรฉs en S ou en virgule ou des bacilles hรฉlicoรฏdaux sont alors observรฉes par examen bactรฉriologique. Lโexamen direct ou en contraste de phase sur fond noir laisse apparaรฎtre des germes trรจs mobiles et caractรฉristiques ยซ en vol de moucheron ยป. La culture utilise des gรฉloses chocolat ou Columbia. Mais lโagent se multiplie difficilement en milieu de culture.
Le diagnostic indirect prรฉsente lui aussi des difficultรฉs : le titrage dโanticorps sรฉriques nโa que peu dโintรฉrรชt, leur taux nโaugmentant que faiblement aprรจs lโinfection. La sรฉrologie se base plutรดt sur la dรฉtection dโimmunoglobulines dans le mucus vaginal. Un test dโagglutination a ainsi รฉtรฉ dรฉveloppรฉ, qui peut รชtre utilisรฉ pour le diagnostic de troupeau. On teste 10 % du troupeau si possible, au moins dix vaches. Il convient de ne tester que des vaches nโรฉtant pas en chaleurs, la prรฉsence de sang entraรฎnant des rรฉactions faussement positives. Deux ELISA ont รฉgalement รฉtรฉ mise au point pour la dรฉtection sur mucus vaginal. La premiรจre permet la dรฉtection des immunoglobulines de type G et le diagnostic collectif, la seconde la dรฉtection des immunoglobulines de type A et le diagnostic individuel en cas dโavortement.
Examens complรฉmentaires
Le sang de lโavortรฉe est le plus utilisรฉ, mais se limiter ร ce seul et unique prรฉlรจvement serait une erreur : il est prรฉconisรฉ dโeffectuer un prรฉlรจvement sanguin sur plusieurs bovins du voisinage de la vache ayant avortรฉ pour que lโรฉtude sรฉrologique soit interprรฉtable afin de pouvoir dรฉgager le statut de lโรฉlevage. Plusieurs critรจres de laboratoire et de terrain permettent dโaboutir ร une hypothรจse de circulation du virus BVD : le virus est isolรฉ sur plusieurs avortons dโun mรชme cheptel (mais un autre agent peut รชtre responsable) ; outre les avortements, certains signes cliniques sont caractรฉristiques sur les autres bovins de lโรฉlevage ; enfin, des lรฉsions typiques sont observรฉes sur le foetus. De plus, il est indispensable dโรฉtablir un diagnostic diffรฉrentiel, et surtout ne pas invoquer de maniรจre systรฉmatique la BVD-MD pour expliquer tout avortement, en passant ร cรดtรฉ dโinformations orientant vers une autre cause.
Toute la difficultรฉ rรฉside dans lโinterprรฉtation des rรฉsultats sรฉrologiques (sรฉroneutralisation) : ici plus quโailleurs, ยซ un rรฉsultat positif ยป nโest pas synonyme de ยซ un animal malade ยป. Tout signe dโappel associรฉ ร une sรฉrologie positive sur plusieurs animaux ainsi que la dรฉcouverte dโInfectรฉs Permanents Immunotolรฉrants (IPI) ne fait que confirmer la suspicion. Les IPI sont le plus souvent sรฉronรฉgatifs et viropositifs. Cependant les IPI prรฉsentant la forme ยซ maladie des muqueuses ยป sont parfois porteurs dโanticorps (anticorps colostraux ou dirigรฉs contre de antigรจnes non communs aux deux virus du BVD). En ce qui concerne les animaux atteints de la forme ยซ retard de croissance ยป, ils sont souvent sรฉronรฉgatifs et viropositifs (IPI), ou plus rarement sรฉropositifs en fonction du stade de gestation au moment de la circulation virale. Dans le cas des avortements et de mortalitรฉ embryonnaire, le virus est en gรฉnรฉral en cours de diffusion : les analyses rรฉvรจlent alors des animaux en cours de sรฉroconversion.
La sรฉroconversion nโest pas toujours observable au moment de lโavortement et les lรฉsions foetales ne sont pas spรฉcifiques. La forme BVD sur les adultes sera rรฉvรฉlรฉe par une sรฉroconversion (2 prise de sang ร 2 voire 3 ou 4 semaines dโintervalles, sur une dizaine dโanimaux). Sur les jeunes veaux seront privilรฉgiรฉes une mise en รฉvidence du virus dans les ganglions mรฉsentรฉriques, la rate ainsi que des prises de sang sur les couples mรจre-veau (sรฉrologie). Pour les animaux atteints de malformations congรฉnitales, il convient de prรฉlever un รฉchantillon sanguin des veaux avant la prise colostrale, ou des mรจres, pour examen sรฉrologique ; les veaux ne sont en gรฉnรฉral pas porteurs du virus et souvent sรฉropositifs. Il faut garder en mรฉmoire que seuls les bovins viropositifs sont infectรฉs et contagieux. Lโisolement du virus sur avorton est considรฉrรฉ comme pathognomonique, mais il รฉchoue parfois, sans que lโon sache vraiment pourquoi.
Le virus peut รชtre directement observรฉ par culture (uniquement pour les souches cytopathogรจnes) ou bien par immunofluorescence ou ELISA ร partir 66 de la fraction sanguine leucocytaire, le virus se multipliant plus intensรฉment dans ces cellules. La recherche de lโagent responsable est peu performante, on prรฉfรจrera la recherche dโanticorps maternels, mรชme sโils ne tรฉmoignent que de lโexposition rรฉcente ou ancienne de la mรจre. Enfin, lโamplification gรฉnรฉtique par PCR permet de dรฉtecter la prรฉsence de son ADN dans le lait, le sang ou les tissus congelรฉs. La mรฉthode sรฉrologique de rรฉfรฉrence est la sรฉroneutralisation (son
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Table des matiรจres
LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES FIGURES
LISTE DES IMAGES
INTRODUCTION
I.PRESENTATION DU SITE INTERNET
I.1. Pourquoi un site internet
I.2. Contenu du site internet
I.3. Organisation du site internet et fonctionnement global
II.REALISATION TECHNIQUE DU SITE INTERNET
II.1. Sources
II.1.1 Maladies bactรฉriennes
II.1.1.1. Brucellose
II.1.1.2. Salmonellose
II.1.1.3. Fiรจvre Q
II.1.1.4. Listรฉriose
II.1.1.5. Leptospirose
II.1.1.6. Chlamydophilose
II.1.1.7. Campylobactรฉriose
II.1.1.8. Urรฉaplasmose
II.1.1.9. Arcanobacter
II.1.1.10. Bacillus licheniformis
II.1.1.11. Haemophilose
II.1.1.12. Mycoplasmose
II.1.1.13. Erhlichiose
II.1.2. Maladies virales
II.1.2.1. BVD-MD
II.1.2.2. IBR-IPV
II.1.2.3. FCO
II.1.3. Protozootique
II.1.3.1. Toxoplasmose
II.1.3.2. Nรฉosporose
II.1.3.3. Sarcosporidiose
II.1.3.4. Trichomonose gรฉnitale
II.1.4. Avortement fongique
II.1.5. Mycotoxines
II.1.5.1. La zรฉaralรฉnone
II.1.5.2. Toxines de Stachybotrys atra
II.1.5.3. Toxines de Penicillium roqueforti
II.1.6. Phyto-oestrogรจnes
II.2. Outils utilisรฉs
II.2.1. Elaboration du site internet proprement dit
II.2.2. Manipulation des images
II.3. Mode dโemploi du site internet6
II.3.1. Configuration minimale requise
II.3.2. Lancement du site internet
III. DISCUSSION
III.1. Difficultรฉs rencontrรฉes
III.2. Limites du site internet
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE
ANNEXE
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