Visualisation du produit PCR par électrophorèse sur gel d’agarose 

Table des matières

Présentation de l’établissement
Introduction
Partie1 : revue bibliographique
1. Bases clinique et histologique du mélanome
a) Mélanome
b) Epidémiologie
c) Facteurs de risque
d) Diagnostic clinique
e) Histogenèse du mélanome
2. Biologie moléculaire des mélanomes
a) Généralités
 Cancer
 Mutations
b) Définition médicale du gène BRAF
c) L’apport de la biologie moléculaire dans le diagnostic
Partie 2 : Matériel et méthodes
A. Matériel utilisé
1. Echantillonnage
a) Patients
2. Stratégies de travail
B. Méthode
I. Extraction d’ADN
a) Principe
b) Protocole expérimental
II. Dosage des acides nucléiques
a) Principe
b) Protocole expérimental
III. Amplification de l’ADN extrait par PCR
a) Principe
b) Les acteurs de la PCR
c) La réaction de la PCR
d) Protocole expérimental
IV. Visualisation du produit PCR par électrophorèse sur gel d’agarose
a) Principe
b) Réactifs nécessaires
c) Protocole expérimental
V. Séquençage des produits du gène BRAF
a) Principe
1. Purification de produit PCR
a) Principe
b) Réactifs nécessaires
c) Protocole expérimental
2. Réaction de séquence
a) Principe
b) Réactifs nécessaires
c) Protocole expérimental
3. Purification du produit de la réaction de séquence
a) Principe
b) Réactifs nécessaires
c) Protocol expérimental
4. Chargement de l’appareil
5. Les outils de la bio informatique
Partie 3 : Résultats et discussions
A. Paramètres épidémiologiques
1. Sexe
2. L’âge
3. Phototype
B. Paramètres cliniques
1. Type anatomopathologie
C. Etude moléculaire
1. Dosage et qualité d’ADN extrait
2. Amplification de l’exon 15 du gène BRAF
3. Résultats de séquençage
Conclusion et perspectives
Référence Bibliographique