Validation de la décidualisation des HIESC

Table des matières

CHAPITRE 1 :INTRODUCTION
1.1 Décidualisation
1.1.1 La décidualisation survient en seconde phase du cycle menstruel
1.1.2 La biologie cellulaire et moléculaire de la décidualisation
1.1.2.1 Régulation du cycle cellulaire des CSE humaines durant la décidualisation
1.1.3 Problématique de recherche liée à la décidualisation
1.2 p53
1.2.1 Historique de la protéine p53
1.2.2 Biochimie de la protéine p53
1.2.2.1 Domaines fonctionnels de p53
1.2.3 Rôle général de p53 dans la cellule
1.2.4 Régulation de p53
1.2.4.1 Régulation négative de l’activité de p53
1.2.4.2 Activation de la protéine p53
1.2.4.3 Régulation de p53 par des modifications post-traductionnelles
1.2.4.4 Régulation de l’activité transactivatrice de p53
1.2.5 Activité de p53 et son rôle de régulation du cycle cellulaire
1.2.6 Activité de p53 et son rôle dans l’induction de l’apoptose
1.2.7 Localisation intracellulaire de p53
1.3 Le rôle potentiel de p53 dans la décidualisation
1.4 Problématique de recherche
1.5 Objectifs et hypothèses
1.6 Modèle cellulaire et approches expérimentales
CHAPITRE II :MATERIEL ET METHODES 
2.1 Cellules et réactifs
2.2 Procédures expérimentales
2.2.1 Décidualisation in vitro des HIESC
2.2.2 Validation de la décidualisation par le dosage de la prolactine sécrétée
2.2.3 Inhibition pharmacologique de la voie de la PKA à l’aide du H89
2.2.4 Validation de la décidualisation par microscopie en contraste de phase
2.2.5 Immunobuvardage de type Western (WB)
2.2.6 Évaluation de la localisation intracellulaire de p53 par immunofluorescence
2.2.7 Analyses statistiques
CHAPITRE III: RESULTATS 
3.1 Validation de la décidualisation des HIESC
3.1.1 Changements morphologiques des HIESC décidualisées
3.1.2 Sécrétion du marqueur protéique prolactine par les HIESC décidualisées
3.2 Accumulation de p53 dans les HIESC au fil de la décidualisation
3.3 Implication de la voie de la PKA dans la régulation de p53 durant la décidualisation
3.3.1 Inhibition de la voie de la PKA dans les HIESC
3.3.2 Inhibition de la voie de la PKA dans les HIESC en décidualisation
3.4 Régulation de p53 par des modifications post-traductionnelles dans les HIESC au fil de la décidualisation
3.4.1 Analyse de la variation de la phosphorylation de la sérine 15 de p53
3.4.2 Analyse de la variation de l’acétylation de la lysine 382 de p53
3.5 Étude de l’activité de p53 à travers l’analyse de gènes cibles pendant la décidualisation
3.5.1 Mesure des niveaux de la protéine p21 dans les HIESC
3.5.2 Mesure des niveaux de la protéine cycline BI dans les HIESC
3.5.3 Mesure des niveaux de la protéine Cdc2 dans les HIESC
3.6 Localisation intracellulaire de p53 au cours de la décidualisation
CHAPITRE IV :DISCUSSION 
CHAPITRE V :CONCLUSION
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES