Préservation de la variabilité génétique

Table des matières

INTRODUCTION
PREMIÈRE PARTIE : ÉTUDE BIBLIOGRAPHIQUE
I. Le clonage
A. Techniques et résultats
1. Techniques
a) Maturation in vitro des ovocytes receveurs
b) Enucléation des ovocytes receveurs par micromanipulation
c) Préparation des cellules donneuses
d) Reconstitution de l’embryon
e) Fusion – activation
f) Développement embryonnaire et fœtal
2. Résultats actuels du clonage somatique
a) Nombre d’animaux obtenus
b) Rendement encore très variable
c) Une efficacité qui progresse
B. Applications possibles : perspectives
1. Etudes fondamentales sur la différenciation cellulaire
2. Diminution du nombre d’animaux nécessaires en expérimentation
3. Accélération du progrès génétique en sélection
4. Standardisation de la qualité
5. Sauvegarde d’espèces
6. Création d’un fonds génétique dans l’espèce bovine
7. Obtention d’animaux génétiquement modifiés
C. Problèmes soulevés
1. Préservation de la variabilité génétique
2. Conditions nécessaires pour l’application commerciale du clonage
3. Coût de la recherche scientifique
4. Position du public
5. Ethique et politique
D. Anomalies rencontrées chez les clones
1. Pendant la gestation
a) Pertes rencontrées au premier trimestre
b) Pertes des deuxième et troisième trimestres
2. Chez les jeunes de 0 à 4 mois
3. Le cas particulier du syndrome du gros veau ou LOS (Large Offspring Syndrom )
E. Causes possibles de ces anomalies
1. Bases physiologiques et moléculaires du syndrome de gros veau
2. Les facteurs cytoplasmiques
3. L’environnement utérin
4. Les mutations génétiques : les mitochondries et les cellules somatiques adultes
5. L’empreinte parentale
6. Le statut immunitaire
7. Syndrome du gros veau ou plutôt syndrome du gros placenta ?
II. Le développement après la naissance
A. La croissance
B. Les maladies
1. Maladies rencontrées chez les clones
2. Cas particulier du « vieillissement » des clones
3. La reproduction
7 a) Capacité des clones à se reproduire
b) Statut hormonal et puberté des clones
4. La production
a) Production laitière
b) Production carnée
III. Les paramètres cliniques, hématologiques et biochimiques
A. Paramètres cliniques
1. Fréquence respiratoire
2. Fréquence cardiaque
3. Température
B. Paramètres hématologiques
1. La lignée rouge
a) Numération globulaire (NG)
b) Hématocrite (Ht)
c) Taux d’hémoglobine (Hb)
d) Indices de Wintrobe (VGM, CCMH, TGMH)
• Volume Globulaire Moyen (VGM)
• Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine (CCMH)
• Teneur Globulaire Moyenne en Hémoglobine (TGMH)
e) Thrombocytes ou plaquettes
2. La lignée blanche (leucocytes)
a) Granulocytes neutrophiles (ou polynucléaires neutrophiles)
b) Granulocytes éosinophiles
c) Granulocytes basophiles
d) Monocytes
e) Lymphocytes
C. Les paramètres biochimiques
1. Urée
2. Créatinine
3. β-Hydroxy-butyrate (BOH)
4. Protéines totales
5. Albumine
6. Gamma glutamyl transpeptidase (GGT)
7. Aspartate Aminotransférase (ASAT)
8. Fibrinogène
9. Facteurs de variation des analyses biochimiques
a) Variations liées au conditionnement et au stockage du prélèvement
b) Variations selon la saison et le moment de la journée
10. Biochimie lors des syndromes inflammatoires
DEUXIÈME PARTIE : ÉTUDE PERSONNELLE
I. Animaux, Matériels et Méthodes
A. Période
B. Animaux
C. Méthodes d’obtention des individus clonés
1. Obtention des ovocytes
2. Obtention des embryons
a) Le transfert nucléaire
b) Devenir in vitro des embryons
3. Préparation des receveuses
4. Suivi des gestations
a) Suivi biochimique
b) Suivi échographique
5. Naissance
6. Obtention des témoins
D. Examen des animaux
1. Animaux étudiés
2. Examen clinique
E. Prises de sang et mesures effectuées
F. Traitement statistique des données
II. Résultats
A. Etude clinique
1. Température
2. Fréquence cardiaque
3. Fréquence respiratoire
B. Hématologie
1. Lignée rouge
a) Nombre d’hématies
b) Hématocrite
c) Hémoglobine
d) Volume Globulaire Moyen
e) CCMH
f) TGMH
g) Plaquettes
2. Lignée blanche
a) Granulocytes neutrophiles
b) Granulocytes éosinophiles
c) Basophiles
d) Monocytes
e) Lymphocytes
C. Biochimie
1. Urée
2. Créatinine
3. β-hydroxybutyrate
4. Protéines totales
5. Albumine
6. GGT
7. ASAT
8. Fibrinogène
III. DISCUSSION
A. Choix des animaux
1. Témoins
2. Clones
B. A propos des méthodes de mesure
1. Mesures cliniques
2. Mesures effectuées sur les prélèvements de sang
C. A propos des résultats
1. Clinique
2. Hématologie
3. Biochimie
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE
ANNEXES