L’innocuité des virus oncolytiques

Table des matières

Liste des abréviations
Table des illustrations
Introduction
I- Etude bibliographique
I.1. Les gliomes
I.1.1 Définition
I.1.2 Epidémiologie
I.1.2.1. Les cancers du SNC
I.1.2.2. Les gliomes
I.1.3 Classifications
I.1.3.1. Evolution des classifications au cours du temps
I.1.3.2. Classifications OMS 2007
I.1.4 Le glioblastome multiforme (GBM) : une entité particulière
I.1.4.1. Généralités
I.1.4.2. Bases moléculaires du développement des GBM
a. Voies de signalisation oncogéniques
i. p16INK4a/CDK-Cycline/Rb
ii. p14ARF-MDM2/4-p53
iii. PI3K-PTEN-Akt-mTOR
iv. Ras-Raf- MAPK
b. Altérations épigénétiques
I.1.4.3. Une classification moléculaire des GBM
a. GBM primaires et secondaires : des différences moléculaires
b. Vers une classification plus fine des différents types de GBM
I.1.4.4. Diagnostic
a. Présentation clinique
b. Imagerie
I.1.4.5. Traitement
a. Chirurgie
b. Radiothérapie
c. Chimiothérapie
I.1.4.6. Pronostic
I.2. Utilisation des virus oncolytiques dans la thérapie des gliomes
I.2.1 La naissance de virus oncolytiques
I.2.2 Virus oncolytique : principe
I.2.2.1. Deux types de virus oncolytiques
a. Les virus naturellement oncolytiques
b. Les virus oncolytiques génétiquement modifiés (ou virus recombinants)
I.2.2.2. Une stimulation de la réponse immunitaire
I.2.3 Utilisation des virus oncolytiques dans le traitement des gliomes
I.2.3.1. Herpes simplex virus
a. Intérêt du virus
b. Des virus oncolytiques atténués
c. Des virus « armés »
d. Une innocuité confirmée par les essais cliniques
e. Une efficacité qui reste à déterminer
I.2.3.2. Adenovirus
a. Intérêt en tant que VO
b. Différents types d’Adénovirus oncolytiques
i. Deux protéines à l’origine de la sélectivité tumorale : les virus de première génération
ii. Augmenter la sélectivité : les virus de deuxième et troisième génération
c. Une innocuité intéressante mais remise en question
d. Une efficacité qui reste encore à prouver
I.2.3.3. Le virus de la maladie de Newcastle
a. Intérêt en tant que VO
b. Différents types de NDV oncolytiques présentant des innocuités et efficacités variées
i. Des souches mésogéniques
ii. Des souches lentogéniques
I.2.3.4. Réovirus
a. Intérêt en tant qu’OV
b. Une innocuité et une efficacité intéressante
i. Etudes précliniques : un virus prometteur
ii. Essais cliniques : une innocuité et une efficacité limitée
I.2.3.5. D’autres virus prometteurs dans le traitement des gliomes
I.3. Le virus myxomateux : un Poxvirus particulier
I.3.1 Classification, structure et organisation du virus
I.3.1.1. Classification au sein des Poxviridae
I.3.1.2. Structure des virions
I.3.1.3. Organisation du génome
I.3.2 Cycle viral
I.3.2.1. Entrée dans la cellule
I.3.2.2. Réplication et formation des virions
a. Expression des gènes précoces
b. Réplication du génome viral
c. Expression des gènes intermédiaires et tardifs
d. Assemblage du virion
I.3.3 Pathogénicité
I.3.3.1. Un virus responsable de la myxomatose
I.3.3.2. Des facteurs de pathogénicité variés
a. Inhibition de l’apoptose
b. Inhibition de la réponse aux interférons
c. Inhibition de la réponse immunitaire
d. Activation du cycle cellulaire
e. Facteurs d’hôte
f. Bilan facteurs de virulence
I.4. Intérêt du virus myxomateux dans le traitement des gliomes
I.4.1 Le MYXV est sélectif et inoffensif
I.4.1.1. Le MYXV est très spécifique des lagomorphes
I.4.1.2. Le MYXV est sélectif envers les cellules tumorales
I.4.1.3. L’injection intracrânienne du MYXV est inoffensive pour les cellules cérébrales normales
I.4.1.4. Le MYXV est capable d’infecter et de détruire sélectivement diverses lignées cellulaires de gliomes
I.4.2 Efficacité du MYXV sur des modèles rongeurs de gliomes
I.4.2.1. Une efficacité optimale sur les souris immunodéprimées
I.4.2.2. La combinaison MYXV-Rapamycine semble efficace
I.4.2.3. L’association avec les cellules Natural Killer est prometteuse
I.4.2.4. Améliorer la délivrance du MYXV
I.4.2.5. Une comparaison entre les différentes stratégies est-elle possible ?
I.4.2.6. Persistance de l’infection in vivo : le rôle du système immunitaire
I.4.3 Les limites du MYXV dans le traitement du gliome
I.4.3.1. Un manque relatif d’efficacité
I.4.3.2. Le système immunitaire à l’origine de l’élimination du virus
I.4.3.3. La délivrance du MYXV n’est pas optimale
I.4.3.4. Le modèle rongeur n’est pas idéal
I.4.4 L’avenir du MYXV
I.4.4.1. Améliorer l’efficacité du MYXV
I.4.4.2. Optimiser la délivrance et la répartition du MYXV au sein du cerveau
I.4.4.3. Le modèle canin : un modèle d’intérêt
II- Etude expérimentale
Introduction
II.1. Matériels et méthodes
II.1.1 Virus
II.1.2 Lignées cellulaires
II.1.3 Titrage des virus sur RK13
II.1.4 Quantification de la charge virale par PCR quantitative
II.1.5 Détermination de la viabilité cellulaire après infection
II.1.6 Western blot : détermination du niveau endogène de p-Akt dans les différentes lignées cellulaires
II.1.7 Analyses statistiques
II.2. Résultats
II.2.1 La lignée J3T : une lignée permissive et sensible au MYX
II.2.1.1. Une permissivité majeure au MYXV souche SG33
II.2.1.2. Influence de la MOI dans l’étude de la permissivité des J3T
a. J3T est permissive au MYXV
b. Une cinétique modifiée par la mortalité cellulaire
c. Une pénétration cellulaire facilitée pour SG33
II.2.1.3. Le MYXV est cytotoxique pour les J3T
II.2.2 Cytotoxicité de SG33 et T1 envers d’autres lignées cellulaires de gliomes canins
II.2.2.1. Une sensibilité différente en fonction des lignées
II.2.2.2. SG33 est plus cytotoxique que T1
II.2.3 Cinétique de mortalité cellulaire au cours du temps
II.2.4 Une permissivité différente en fonction des lignées cellulaires
II.2.4.1. Une pénétration cellulaire facilitée pour SG33
II.2.4.2. La capacité de réplication du MYXV est différente selon la souche et la lignée cellulaire considérée
II.2.5 Le niveau d’Akt phosphorylé semble impliqué dans la sensibilité et la permissivité au MXYV
II.3. Discussion
Conclusion générale
Bibliographie