Leucémies lymphoïdes aiguës

Table des matières

Chapitre I – Introduction
1. L’hématopoïèse
1.1 Les sites de l’hématopoïèse chez l’humain
1.2 Les cellules souches hématopoïétiques
1.2.1 Autorenouvellement
1.2.2 Différenciation cellulaire
1.3 Régulation
2. Les leucémies
2.1 Définition et classification des leucémies
2.2 Les leucémies aiguës
2.2.1 Leucémies lymphoïdes aiguës
2.2.1.1 Les leucémies lymphoïdes aiguës de type B
2.2.1.2 Les leucémies lymphoïdes aiguës de type T
2.2.2 Leucémies myéloïdes aiguës
2.2.3 Leucémies aiguës de phénotype mixte
3. Le gène MLL
3.1 Caractérisation du gène et de la protéine MLL
3.2 Rôle de la protéine MLL dans la régulation de la transcription
3.3 Translocations chromosomiques de MLL dans les leucémies
3.3.1 Partenaires de fusion communs de MLL
3.4 La fusion MLL-ENL
3.5 Modélisation in vivo de leucémies aiguës humaines MLL
4. Hypothèses et objectifs
4.1 Problématique
4.2 Hypothèse et objectifs
Chapitre II – Matériel et méthodes 
1. Purification de cellules souches/progénitrices hématopoïétiques de sang de cordon ombilical humain par sélection négative
2. Technique de clonage
2.1 Les plasmides
2.2 Production d’ADN
3. Production de virus par transfection au phosphate de calcium
3.1 Titration de virus
4. Infection de cellules souches/progénitrices hématopoïétiques par les rétrovirus
5. Xénogreffe des cellules infectées dans un modèle in vivo
5.1 Souris NSG
5.2 Irradiation des souris
5.3 Injection intra-fémorale
5.4 Euthanasie et prélèvement des cellules pour analyse
6. La cytométrie en flux
6.1 Analyse des leucémies primaires
6.2 Analyse des leucémies secondaires
7. Infection des cellules leucémiques primaires par les lentivirus
8. Triage des cellules marquées en eGFP/BFP et injection des souris secondaires
Chapitre III – Résultats 
1. Leucémies primaires MLL-ENL LoxP eGFP
1.1 Expression du marqueur eGFP dans les cellules transduites par les rétrovirus
1.2 Analyse et caractérisation des xénogreffes dans les souris primaires
1.2.1 Analyse de cellules de la moelle osseuse par cytométrie en flux
1.2.2 Analyse de cellules de la rate par cytométrie en flux
2. Leucémies secondaires MLL-ENL LoxP eGFP avec cre recombinase
2.1 Expression du marqueur BFP dans les cellules transduites par les lentivirus et tri cellulaire
2.1.1 Survie et prolifération in vitro suivant le tri cellulaire
2.2 Analyse et caractérisation des xénogreffes dans les souris secondaires
Chapitre IV – Discussion et Conclusion 
1. Discussion
1.1 Les leucémies primaires MLL-ENL-LoxP eGFP
1.2 Les leucémies secondaires MLL-ENL LoxP avec cre recombinase
2. Perspectives et conclusion
Bibliographie