Table des matières
1- Introduction
2- Données bibliographiques
2-1. L’Allergie
2-1.1. L’allergie aux protéines du lait de vache (APLV
2-1.2. Les différentes réactions aux protéines du lait de vache
2-1.3. Conséquences nutritionnelles de l’allergie aux protéines du lait de vache
2-2. Prévention et Prise en charge de l’allergie aux protéines de lait de vache
2-2.1. Allaitement artificiel
2-2.1.1. Préparation « HA
2-2.1.2. Hydrolysats de protéines
2-2.1.3. Préparations à base d’acides aminés libres
2-2.2. L’allaitement maternel
2-2.3. Régime d’éviction
2-2.4. Substituts à base de végétaux
2-2.4.1. Boissons végétales
2-2.4.2. Préparations à base de protéines de soja
2-2.4.3. Hydrolysats de protéines de riz
2-3. Les protéines de riz
2-4. Allergènes végétaux
2-5. L’allergène déterminerait sa voie d’entrée au niveau de la muqueuse intestinale
2-6. Histologie
2-6.1. L’atrophie villositaire
2-6.2. Augmentation du nombre de lymphocytes intra épithéliaux
3- Matériels et méthodes
3-1. Produits et Réactifs
3-2. Échantillons utilisés
3-2.1. Le lait de vache
3-2.2. La Formule lactée utilisée
3-3. Caractérisation biochimique de la formule lactée
3-3.1. Dosage de protéines totales
3-3.1.1. Principe
3-3.1.2. Mode opératoire
3-3.2. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS
3-3.2.1. Principe
3-3.2.2. Mode opératoire
3-4. Etude de l’antigénicité de la formule à base de riz hydrolysé
3-4.1. Animaux
3-4.2. Adjuvant
3-4.3. Immunisation du modèle animal
3-4.3.1. Répartition des animaux
3-4.3.2. Protocole d’immunisation
3-4.4. Administration de la formule a base de riz hydrolysé
3-4.4.1. Évaluation de la consommation journalière
3-4.4.2. Mesure de la croissance pondérale
3-4.5. Prélèvement sanguin
3-4.6. Dosage des anticorps sériques
3-4.6.1. Principe
3-4.6.2. Mode opératoire
3-4.6.3. Etude de la réactivité
3-5.Etude histologique
3-5.1. Traitement des échantillons
3-5.1.1. Fixation
3-5.1.2. Déshydratation
3-5.1.3. Clarification
3-5.1.4. Inclusion
3-5.2. Traitement des lames
3-5.2.1. Etalement sur lames
3-5.2.2. Déparaffinage
3-5.2.3. Réhydratation
3-5.2.4Coloration
3-5.3. Mesure des villosités intestinales et comptages des L.I.E
3-5.3.1. Mesure des villosités intestinales
3-5.3.2. Comptage des lymphocytes intra épithéliaux (L.I.E)
3-6.Test de provocation ex vivo en chambre de Ussing2
3-6.1. Les formules infantiles utilisées
3-6.1.1. Produit 1
3-6.1.2. Produit 2
3-6.1.3. Produit 3
3-6.2. Mesure de l’allergenicité des différents échantillons
3-6.2.1. Principe de la chambre de Ussing
3-6.2.2. Montage de fragments de jéjunum de souris en chambre de Ussing
3-6.3. Signes cliniques: test de provocation in vivo par voie intrapéritonéale
3-7. Analyse statistique
4. Résultats
4-1. Caractérisation biochimique des échantillons
4-1.1. Dosage des protéines totales
4-1.2. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS
4-2.Effet de la formule infantile à base de protéines de riz hydrolysées sur la croissance pondérale
4-3. Consommation de l’hydrolysat de protéines de riz chez les souris
4-4. Etude de l’antigénicité (titres sériques en anticorps anti β-Lg et anti α-La des souris Balb/c immunisées à la β-Lg et à l’α-La)
4-4.1. Titres sériques en IgG
4-4.2. Titres sériques en IgE
4-4.3. Etudes de la réactivité immunologique
4-4.3.1. Mesure de la réactivité de l’hydrolysat de protéines de riz
4-5. Etude histologique
4-5.1. Histologie de la muqueuse intestinale des souris témoins négatifs
4-5.2. Histologie de la muqueuse intestinale des souris témoins positifs
4-5.3. Histologie de la muqueuse intestinale des souris ayant suivis un régime à base d’hydrolysat de protéines de riz
4-6. Evaluation de la hauteur villositaire intestinale des souris ayant suivis un régime à base d’hydrolysat de protéines de riz
4-7. Comptage des lymphocytes intra-épithéliaux (L.I.E)
4-8. Test de provocation in vitro en chambre Ussing Etude in vitro de l’interaction des protéines sensibilisantes, du lait de vache, lait infantile standard, formule infantile à base de soja et formule infantile à base de riz hydrolysé avec les muqueuses de souris sensibilisées à la ß-Lg et α-La
4-8.1. Effet sur l’Isc
4-8.1.1. Effet de la ß-Lg et α-La sur le courant de court circuit tissulaire l’Isc
4-8.1.2. Effet de l’ovalbumine sur l’Isc
4-8.1.3. Effet du lait de vache sur le courant de court circuit
4-8.1.4. Effet des préparations infantiles (Standard, Soja, Riz hydrolysé) sur l’Isc
4-8.1.5. L’augmentation du courant de court circuit (ΔIsc)
4-8.2. Effet sur la DDP
4-8.3. Effet sur la conductance
4-8.3.1. Effet de la ß-Lg et l’α-La sur la conductance (G)
4-8.3.2. Effet du lait de vache sur la conductance (G)
4-8.3.3. Effet des préparations infantiles (Standard, Soja, Riz hydrolysé) sur la conductance
4-8.4. Effet du furosémide
4-8.5. Effet du glucose
4-8.6. Tests de provocation par voie intrapéritonéale à la β-Lg et α-La: signes cliniques
5- Discussion
Conclusion
Références bibliographiques
Annexe
