Les cellules souches mésenchymateuses (MSCs)

Table des matières

INTRODUCTION
PREMIERE PARTIE: ETUDE BIBILIOGRAPHIQUE
I. Généralités sur les cellules souches : sources, caractérisation et mécanismes d’action
Sources de cellules souches mésenchymateuses et notions de niches
Caractéristiques des MSCs
Mécanisme d’action des MSCs
II. Etude des ASCs canines
Intérêts et applications
Travaux réalisés sur les ASCs canines
Perspectives
Limites actuelles des études réalisées
Caractérisation et production des MSCs canines
Caractérisation des MSCs canines
a) Type de MSCs canines utilisées
b) Caractérisation des MSCs canines
Etude comparative de la production des ASCs canines dérivées de tissu adipeux
PARTIE EXPERIMENTALE : PRODUCTION ET CARACTERISATION DES ASCs CANINES A STROMALAB
I. Matériel et méthodes
Chiens et prélèvements de tissu adipeux
Cultures cellulaires
Extraction des cellules : préparation de la Fraction Stromale Vasculaire (SVF)
Mise en culture
Colony Forming Units fibroblastics (CFU-f) .
Prolifération
Potentiels de différenciation adipocyraire et ostéoblastique
a) Potentiel de différenciation adipocytaire
b) Potentiel de différenciation ostéoblastique
Potentiel de différenciation chondrocytaire
Méthode d’analyse par q PCR
Caractérisation des cellules par cytométrie en flux
Congélation des cellules.
Analyse des données
II. Résultats
Multiplication
Rendements et temps de doublement des ASCs de tissu adipeux sous cutané
CFU-f des ASCs de tissu adipeux sous cutané
Prolifération des ASCs de tissu adipeux sous cutané
a) Tendance
b) Passages successifs
Comparaison de la prolifération des ASC de tissu adipeux sous cutané et viscéral
a) Rendement et temps de doublement
b) CFU-f
c) Prolifération
Potentiel de différenciation
Potentiel adipocytaire
a) Aspect qualitatif au cours de la différenciation
b) Coloration
c) qPCR
Potentiel ostéoblastique
a) Aspect qualitatif au cours de la différenciation
b) Coloration
c) qPCR
Potentiel chondrocytaire
a) Appréciation qualitative de la formation des pellets
b) Coloration
c) qPCR
Cytométrie en flux
III. Discussion
Production
Caractérisation
Potentiel de différenciation
a) Potentiel adipocytaire
b) Potentiel ostéoblastique
c) Potentiel chondrocytaire
Marqueurs de surface
PERSPECTIVES
Production
Caractérisation
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE