Les cellules dendritiques

Table des matières

LISTE DES ILLUSTRATIONS
LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES GRAPHIQUES
LISTE DES ABREVIATIONS
INTRODUCTION
PREMIERE PARTIE : ETUDE BIBLIOGRAPHIQUE
I. Etude de la peau du chien
A. Histologie topographique de la peau
1. L’épiderme
2. La membrane basale
3. Le derme
4. L’hypoderme
5. La vascularisation de la peau
B. Structure histologique de l’épiderme
1. Les kératinocytes
2. Les mélanocytes
3. Les cellules de Langerhans
4. Les cellules de Merkel
C. Le système immunitaire cutané
1. Les cellules de l’immunité cutanée
2. Fonctionnement de l’immunité cutanée
II. Vecteurs de gènes et immunité
A. Vecteurs non viraux
1. Les plasmides / ADN nu
2. Liposomes
B. Vecteurs viraux
1. Vecteurs de gène rétroviraux
2. Virus associés aux adénovirus
3. Vecteurs adénoviraux
4. Bilan : les principales caractéristiques des vecteurs de gènes
DEUXIEME PARTIE : ETUDE EXPERIMENTALE
I. Matériels et méthodes
A. Animaux
B. Vecteurs de gènes
1. Promoteurs
2. Fluorochromes
3. Autres éléments de construction des lentivecteurs
4. Niveau de pureté
5. Bilan : les différents lentivecteurs utilisés
C. Administration épidermique
1. Injection
2. Tape Stripping
3. Raclage
4. Application topique de la solution de lentivecteurs après Tape Stripping ou Raclage
D. Suivi non invasif de l’expression du transgène
1. Cellvizio® Dual Band
2. Méthode d’acquisition
E. Analyses
F. Contrôle de la fluorescence par biopsie
G. Bilan : liste des différents essais réalisés
II. Résultats
A. V0.1 : Administration du lentivecteur par injection
B. V0.2 : Administration topique des lentivecteurs après abrasion de l’épiderme
1. Raclage
2. Tape Stripping
C. V0.3 : essai d’un nouveau promoteur
D. V0.4
1. U : Comparaison de deux administrateurs différents
2. DK : essai d’un promoteur inductible
E. V0.5 : Comparaison de deux promoteurs avec le même fluorochrome
III. Discussion
A. Animaux
B. Vecteurs de gènes
1. Promoteurs
2. Fluorochromes
3. Niveau de pureté
C. Méthode d’administration
1. Injection intradermique
2. Abrasion de l’épiderme et administration topique des lentivecteurs
3. Nouvelle méthode d’administration
D. Suivi non invasif de l’expression du transgène
1. Influence de l’ordre de lecture des points
2. Temps de chauffage du laser
E. Analyse
F. Biopsies
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE
Annexe 1 : Méthode d’analyse des vidéos
Annexe 2 : Analyse statistique des moyennes d’intensité des essais V0.2 à V0.5