Le système immunitaire spécifique

Table des matières

Introduction
1 Etude bibliographique
1.1 Le système immunitaire spécifique: tolérance au soi et maladies auto-immunes
1.2 Les maladies inflammatoires démyélinisantes chez l’homme, la sclérose en plaques
1.3 Les modèles animaux d’affections auto-immunes du système nerveux central
1.3.1 L’encéphalomyélite auto-immune expérimentale (EAE) par immunisation active
1.3.1.1 Description
1.3.1.2 Les protéines de la myéline
1.3.1.3 L’immunopathologie de l’EAE
1.3.2 L’EAE par transfert adoptif de lymphocytes T
1.3.3 Les modèles murins transgéniques
1.3.3.1 Les lignées de souris transgéniques pour un récepteur à l’antigène des lymphocytes T
1.3.3.2 Les lignées de souris transgéniques exprimant un « néo » auto-antigène
2 Etude expérimentale
2.1 Génération d’un modèle d’étude du potentiel encéphalitogène de lymphocytes T CD8+ : justification et limites de la stratégie
2.2 Matériel et méthodes
2.2.1 Les lignées de souris transgéniques
2.2.1.1 La lignée GFAP-HA
2.2.1.2 La lignée CL4-TCR
2.2.1.3 Génération des souris double transgéniques GFAP-HA x CL4-TCR
2.2.1.4 Production et conditions d’élevage de ces lignées
2.2.1.5 Identification des animaux transgéniques par génotypage
2.2.1.5.1 Extraction de l’ADN
2.2.1.5.2 Polymerase chain reaction (PCR)
2.2.2 Génération in vitro de lymphocytes T cytotoxiques de type 1 (Tc1) à partir des lymphocytes T CD8+ des souris CL4TCR
2.2.2.1 Culture des Tc1
2.2.2.2 Caractérisation des populations de LT par ELISA et cytométrie en flux
2.2.2.2.1 ELISA
2.2.2.2.2 Cytométrie en flux
2.2.3 Transfert adoptif des lymphocytes cytotoxiques Tc1
2.2.4 Traitement par injection d’anticorps des souriceaux nouveau-nés double transgéniques GFAP-HA x CL4-TCR
2.2.5 Perfusion des animaux pour les études histologiques
2.3 Résultats
2.3.1 Induction chez les souris GFAP-HA adultes d’une atteinte auto-immune dirigée contre les astrocytes par transfert adoptif de lymphocytes T CD8+ activés spécifiques d’HA
2.3.1.1 Phénotype des lymphocytes Tc1 injectés
2.3.1.2 Contrôle du potentiel pathogène des lymphocytes Tc1 injectés
2.3.1.3 Transfert adoptif de 30×106 lymphocytes Tc1 chez les souris GFAP-HA adultes
2.3.1.3.1 Les Tc1 infiltrent le système nerveux central des souris receveuses GFAP-HA
2.3.1.3.2 Les Tc1 induisent la destruction sélective des cellules exprimant l’auto-antigène
2.3.2 Etude du phénotype des animaux double transgéniques GFAP-HA x CL4-TCR
2.3.2.1 Description
2.3.2.2 Origine auto-immune de la maladie développée par les souriceaux double transgéniques GFAP-HA x CL4-TCR
2.3.2.3 Traitement au long cours des souriceaux double transgéniques GFAP-HA x CL4-TCR avec un anticorps monoclonal anti-CD8 déplétant les lymphocytes CD8+ pathogènes
3 Discussion et perspectives
3.1 Potentiel encéphalitogène de lymphocytes T CD8+ spécifiques d’un auto-antigène astrocytaire
3.2 Modèle double transgénique GFAP-HA x CL4-TCR : rôle des cellules gliales entériques dans le maintien de l’intégrité de la paroi intestinale
3.3 Conclusion générale
Conclusion générale