Table des matières
Introduction
Rappels bibliographiques
1.Histoire naturelle de l’allergie alimentaire
2.Epidémiologie de l’allergie alimentaire
3.La tolérance orale
3.1. Prise d’antigène, diffusion et présentation de l’antigéne
3.2. Rôle des cellules dendritiques.
3.3. Rôle des cellules T Régulatrices (Treg)
3.4. Sensibilisation allergique: rupture de la tolérance orale
4.Physiopathologie d’allergie aux protéines du lait de vache (APLV)
4.1. Les formes immunologiques impliquent dans l’allergie aux protéines de lait de vache
4.1.1. Les réactions de Type I (immédiate, à médiation IgE).
4.1.2. Les réactions de Type IV (retardée, à médiation cellulaire)
4.2. Les facteurs pouvant influencer l’expression des manifestations allergiques
4.2.1. Facteurs épigénétiques
4.2.2. Vitamine D
5.Traitement d’allergie alimentaire
5.1. Régime d’éviction
5.2. Les formules hypoallergéniques
5.3. Les traitements médicamenteux
5.4. Immunothérapie spécifique
5.5. Autre thérapie
6.L’apiculture en Algérie
7.La gelée royale
7.1. Origine
7.2. Compositions chimiques
7.2.1. Propriétés organoleptiques
7.2.2. Teneur en eau
7.2.3. Glucides
7.2.4. Protéines et acides aminés
7.2.5. Lipides
7.2.6. Acides totaux
7.2.7. Minéraux
7.2.8. Vitamines
7.2.9. La cendre
7.2.10. Pigments
7.2.11. Enzymes
7.2.12. Autres
8.Utilisation
9.Conservation de la gelée royale
10.La production mondiale de la gelée royale
11.Propriétés générales de la gelée royale
11.1. Activité antioxydante et anti-inflammatoire
11.2. Activité antitumorale
11.3. Effet immunomodulateur et antiallergique de la gelée royale
Matériels et Méthodes
1.Produits chimiques, réactifs et matériel utilisés
2.La gelée royale
3.Etudes physico-chimiques de la gelée royale.
3.1. Détermination du pH
3.2. Teneur en eau
3.3. Détermination de la teneur en matière minérale totale (ou cendres brutes)
3.4. Détermination de l’acidité
3.5. Dosage des protéines
3.5.1. Détermination de la teneur en azote total (Méthode de Kjeldahl)
3.5.2. Dosage des protéines totales selon la méthode de Lowry et al. 1951
3.6. L’extraction des protéines brutes de la gelée royale
3.6.1. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS
3.7. Le dosage des glucides par la méthode de Bertrand
3.8. Teneur en matière grasse
3.9. Dosage des polyphénols totaux (réactif de Folin Ciocalteu)
4.Etude des propriétés immunomodulatrices de la gelée royale.
4.1. Animaux et condition d’élevage
4.2. Adjuvant
4.3. Répartition des animaux
4.4. Protocole d’immunisation
4.5. Prélèvement sanguin
4.6. Dosage des anticorps IgE totaux
4.6.1. Principe général de la méthode ELISA sandwich
4.6.2. Mode opératoire
4.7. Dosage des anticorps IgG et IgE spécifique anti β-Lg
4.7.1. Principe général de la méthode ELISA indirecte
4.7.2. Mode opératoire
4.8. Détermination des taux d’histamine plasmatiques
4.9. Tests de provocation
4.9.1. Signes cliniques: test de provocation in vivo
4.9.2. La perméabilité vasculaire
4.9.3. Test cutané de réaction d’hypersensibilité de type I
4.9.4. Mesure de la température corporelle
4.9.5. Expérimentation sur l’intestin isolé en Chambre de Ussing: test de provocation ex vivo
4.9.5.1. Principe de la chambre de Ussing
4.9.5.2. Montage de fragments de jéjunum de souris en chambre de Ussing
4.10. Etude histologique
4.10.1. Traitement des échantillons
4.10.1.1. Fixation
4.10.1.2. Déshydratation
4.10.1.3. Clarification
4.10.1.4. Inclusion
4.10.2. Traitement des lames
4.10.2.1. Etalement sur lames
4.10.2.2. Déparaffinage
4.10.2.3. Réhydratation
4.10.2.4. Coloration
4.11. Mesure de la hauteur des villosités
4.11.1. Principe
4.12. Comptage des mastocytes
4.12.1. Mode opératoire
4.12.2. Expression des résultats
4.13. Analyse statistique
Résultats
1.Etudes physico-chimiques de la gelée royale
1.1. Le pH
1.2. L’acidité libre
1.3. Teneur de l’eau
1.4. La cendre
1.5. Teneur totale en protéines dans la gelée royale.
1.5.1. Electrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS.
1.6. Teneur en glucides totaux
1.7. Teneur en lipides
1.8. Teneurs en polyphénols totaux de la gelée royale
2.Etude des propriétés immunomodulatrices de la gelée royale
2.1. Mesure des titres d’IgE totale, IgG et IgE spécifique anti β-Lg: Efficacité de la gelée royale
2.1.1. Effet de la gelée royale sur le taux en IgE totale
2.1.2. Effet de la gelée royale sur le taux en IgG sérique anti b-Lg
2.1.3. Effet de la gelée royale sur le taux en IgE sérique anti b-Lg
2.3. Test de provocation in vitro: Evaluation des signes cliniques.
2.4. La perméabilité vasculaire
2.5. Température corporelle
2.6. Test cutané de réaction d’hypersensibilité de type I
2.7. Etude ex vivo en chambre de Ussing: test de provocation locale
2.7.1. Mesure de la réaction anaphylactique locale (l’Isc)
2.7.1.1. Effet de la sensibilisation à la β-Lg: Témoins positifs
2.7.1.2. Effet de l’ovalbumine sur l’Isc: spécificité de la réponse anaphylactique à la β-lg.
2.7.1.3. Effet du furosémide
2.7.1.4. Effet du glucose
2.7.1.5. Effet de la β-lg sur l’Isc des fragments jéjunaux de souris traitées
2.7.2. Mesure de la conductance
2.7.2.1. Effet de la sensibilisation à la β-Lg: Témoin positif
2.7.2.2. Effet de la β-lg sur la conductance des fragments jéjunaux de souris traitées
2.7.3. Effet sur la DDP
2.8. Etude histologique
2.8.1. Histologie de la muqueuse intestinale des souris témoins négatifs
2.8.2. Histologie de la muqueuse intestinale des souris témoins positifs
2.8.3. Effet de la gelée royale sur la structure histologique de l’épithélium intestinal
2.8.4. Mesure la hauteur villositaire.
2.8. Comptage des mastocytes
Discutions
Conclusion
Références bibliographiques
