Déroulement de la dialyse

Table des matières

LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES FIGURES
INTRODUCTION GENERALE
SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE
Première partie : ETUDE CHIMIQUE 
1 INTRODUCTION 
2 MATERIELS ET METHODES
2.1 Matériels
2.1.1 MATERIEL VEGETAL
2.1.2 DATE ET LIEU DE RECOLTE
2.1.3 PREPARATION ET CONSERVATION DU MATERIEL VEGETAL
2.1.4 LES PRODUITS CHIMIQUES
2.2 Méthodes
2.2.1 METHODES D’EXTRACTION DES PRINCIPES ACTIFS
2.2.1.1 Extraction à froid
2.2.1.2 Extraction à chaud
2.2.2 METHODES DE PURIFICATION
2.2.2.1 Traitement par la chaleur
2.2.2.1.1 Principe .
2.2.2.1.2 Mode opératoire
2.2.2.2 Précipitation par l’acétate neutre de plomb
2.2.2.2.1 Principe 
2.2.2.2.2 Mode opératoire
2.2.2.3 Fractionnement par le n-butanol
2.2.2.3.1 Principe
2.2.2.3.2 Mode opératoire
2.2.2.4 Dialyse
2.2.2.4.1 Principe
2.2.2.4.1 Mode opératoire
2.2.3 METHODE DE CONCENTRATION
2.2.4 CALCUL DE RENDEMENT
2.2.5 METHODES D’ANALYSE
2.2.5.1 Chromatographie sur couche mince
2.2.5.1.1 Principe
2.2.5.1.2. Mode opératoire
2.2.5.2 Criblage phytochimique
2.2.5.2.1 Préparation des extraits à tester
a) Extrait aqueux 
b) Extrait hydroéthanolique
c) Extrait éthanolique
d) Extrait chloroformique
e) Extrait acide
2.2.5.2.2 Méthodes de détection
a) Les alcaloïdes
b) Les saponosides (test de mousse)
c) Les tanins et polyphénols
c1) Test à la gélatine
c2) Test à la gélatine salée 
c3) Test au chlorure ferrique
d) Les stéroïdes, les triterpènes et les stérols insaturés
d1) Test de LIEBERMANN-BURCHARD
d2) Test de SALKOWSKI 
e) Les flavonoïdes et les leucoanthocyanes
e1) Les flavonoïdes (test de WILLSTÄTTER) 
e2) Les leucoanthocyanes (test de BATE-SMITH) 
f) Les désoxyoses (test de KELLER-KILIANI) 
g) Les anthraquinones (test de BORNTRAGER)
h) Les iridoïdes
i) Les coumarines
j) Les hétérosides cyanogénétiques : (TEST DE GRIGNARD)
3 RESULTATS
3.1 Extraction
3.1.1 EXTRACTION A FROID
3.1.1.1 Extraction aqueuse
3.1.1.2 Extraction hydroéthanolique
3.1.2 EXTRACTION A CHAUD
3.2 Purification 
3.2.1 METHODES RETENUES DANS LE PROTOCOLE DE PURIFICATION
3.2.1.1 Traitement par la chaleur
3.2.1.2 Fractionnement par le n-butanol
3.2.2 METHODES NON RETENUES DANS LE PROTOCOLE DE PURIFICATION
3.2.2.1 Précipitation par l’acétate neutre de plomb (ANP)
3.2.2.2 Dialyse
3.3 Rendements
3.4 Analyse des extraits par chromatographie sur couche mince
3.5 Caractérisation chimique 
3.5.1 PROPRIETES PHYSICO-CHIMIQUES
3.5.2 NATURE CHIMIQUE
4. DISCUSSION ET CONCLUSION
Deuxième partie : ETUDE TOXICOLOGIQUE
1 INTRODUCTION
2 MATERIELS ET METHODES
2.1 Matériels
2.1.1 LES ANIMAUX D’EXPERIMENTATION
2.1.1.1 Les animaux à sang chaud
2.1.1.1.1 Les souris 
2.1.1.1.2 Les poussins 
2.1.1.2 Les animaux à sang froid
2.1.1.2 1 Les têtards de grenouille
2.1.1.2.2 Les larves de moustique
2.1.2.2.3 Les poissons
2.1.2 LES VEGETAUX D’EXPERIMENTATION
2.1.3 MATERIELS DE MICROBIOLOGIE
2.1.3.1 Les microorganismes
2.1.3.2 Les milieux de culture
2.1.3.3 Les disques pour les tests d’antibiogramme
2.2 Méthodes
2.2.1 METHODES D’ETUDES DES EFFETS SUR LES ANIMAUX A SANG CHAUD
2.2.1.1 Estimation de la toxicité sur souris
2.2.1.1.1 Test par voie orale
2.2.1.1.2 Test par voie intrapéritonéale
a) Estimation de la toxicité
b) Détermination de la DL50 (24 h)
2.2.1.2 Estimation de la toxicité sur poussins
2.2.1.2.1 Test par voie orale
2.2.1.2.2 Test par voie intrapéritonéale
2.2.2 METHODES D’ETUDE DES EFFETS SUR LES ANIMAUX A SANG FROID
2.2.2.1 Principe 
2.2.2.2 Mode opératoire
2.2.2.3 Détermination de la CL50 (24 h)
2.2.3 METHODES D’ETUDE DES EFFETS SUR LES VEGETAUX
2.2.3.1 Etude des effets sur le pouvoir germinatif des graines
2.2.3.2 Etude des effets sur la croissance des jeunes plantules
2.2.4 METHODES D’ETUDE DES EFFETS SUR LES MICROORGANISMES
2.2.4.1 Stérilisation
2.2.4.2 Test d’activité antimicrobienne
2.2.4.2.1 Méthode de diffusion en milieu solide
a) Principe
b) Mode opératoire
2.2.4.2.2 Détermination de la CMI 
a) Principe
b) Mode opératoire 
2.2.4.2.3 Détermination de la CMB
3 RESULTATS
3.1 Effets sur les animaux
3.1.1EFFETS SUR LES ANIMAUX A SANG CHAUD
3.1.1.1 Effets sur la souris
3.1.1.1.1 Test par voie orale (gavage)
3.1.1.1.2 Toxicité par voie intraperitonéale
a) Description des symptômes d’intoxication
b) Détermination de la DL50 (24 h)
3.1.1.2 Effets sur les poussins
3.1.2 EFFETS SUR LES ANIMAUX A SANG FROID
3.1.2.1 Effets de l’extrait brut sur les têtards de grenouille
3.1.2.2 Effets de l’extrait brut sur les larves de moustique
3.1.2.3 Effets de l’extrait brut sur les alevins de carpe
3.2 Effets sur les végétaux
3.2.1 EFFETS DE L’EXTRAIT BRUT SUR LE POUVOIR GERMINATIF DES GRAINES
3.2.2 EFFETS DE L’EXTRAIT BRUT SUR LA CROISSANCE DES JEUNES PLANTULES 
3.3 Effets sur les microorganismes
3.2.1 ACTIVITE ANTIMICROBIENNE EN MILIEU SOLIDE
3.2.2 DETERMINATION DE LA CMI ET DE LA CMB
3.2.2.1 Détermination de la CMI
3.2.2.2 Détermination de la CMB
CONCLUSION GENERALE
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
REFERENCES WEBOGRAPHIQUES
ANNEXES