Tests des polyphรฉnols et des tanins
a. Les polyphรฉnols : Ils possรจdent des hydroxyles directement liรฉs au noyau benzรฉnique. Ils rรฉagissent avec le chlorure ferrique par le biais dโune rรฉaction de complexation sโeffectuant gรฉnรฉralement en prรฉsence dโun catalyseur alcoolique.
b. Les tanins : Ils constituent un groupe assez hรฉtรฉrogรจne de composรฉs phรฉnoliques ร poids molรฉculaire moyen (600 ร 2000).
Les tanins et les polyphรฉnols ont la propriรฉtรฉ de prรฉcipiter les protรฉines comme la gรฉlatine et de donner des prรฉcipitรฉs rouges dans les acides chauds.
Test des polysaccharides et des sucres rรฉducteurs
a. Les polysaccharides : Ce sont des polymรจres de plus de huit monosaccharides. Ils servent de molรฉcules de structure et de rรฉserve รฉnergรฉtique pour la plante. Ils prรฉcipitent avec un mรฉlange dโeau et dโalcool de proportion en volume (V/V = 3/1)
b. Les sucres rรฉducteurs : Comme leur nom lโindique, ils sont douรฉs du pouvoir rรฉducteur qui se manifeste par leurs rรฉactions avec des oxydants doux. Les prรฉcipitรฉs sont dรปs ร la prรฉsence de la fonction carbonyle. La liqueur de Fehling (mรฉlange des deux solutions dont lโune contient de sulfate de cuivre additionnรฉe de H2SO4) est utilisรฉe pour les identifier.
INTERPRETATIONS DES RESULTATS
ย ย ย ย ย ย ย Lโexistence des deux points dโรฉquivalence pourrait รชtre expliquรฉ de la maniรจre suivante : le caractรจre basique de la solution est due non seulement ร des composรฉs organiques ร caractรจre basique comme les alcaloรฏdes mais aussi ร des bases fortes formรฉes ร partir des cations libres comme K+ et Na+ contenus dans les feuilles et les ions OH- de lโeau lorsquโon est en solution. Comme la solution est constituรฉe dโun mรฉlange de produits, ces deux points seraient dรปs ร des entitรฉs distinctes susceptibles de rรฉagir avec le rรฉactif acide utlisรฉ. Nous avons soupรงonnรฉ que le premier point de neutralisation pourrait provenir des bases fortes formรฉes ร partir de ces cations libres. Dโoรน une variation de pH trop marquรฉe et une diminution de la conductivitรฉ au dรฉbut du dosage. Le deuxiรจme point dโรฉquivalence pourrait provenir des composรฉs organiques ร caractรจres basiques comme les alcaloรฏdes. Lโaciditรฉ de la solution DF au deuxiรจme jour pourrait รชtre due ร une fermentation alcoolique de certains composรฉs organiques quโelle contient. En effet, lors des tests phytochimiques, on a pu rรฉvรฉler la prรฉsence des polysaccharides ร sucres rรฉducteurs en quantitรฉ notable dans lโextrait E-AqDF et nous avons pensรฉ que ces composรฉs seraient fermentรฉs. Cette solution ne peut รชtre conservรฉe plus dโun jour. Le comportement chimique de lโinfusรฉ des feuilles sรจches IS varie trรจs peu pendant les quatre premiers jours. Mais ร partir du 7รจ jour, notre รฉchantillon se comporte comme une base forte (dโaprรจs lโallure des courbes conductimรฉtriques). Nous pensons que ce sont les composรฉs organiques ร caractรจre basique comme les alcaloรฏdes qui se dรฉgradent et disparaissent au cours du temps et seules les bases fortes formรฉes ร partir des cations libres sont les responsables de la basicitรฉ de la solution. Cโest pourquoi le pH de la solution augmente fortement le 8รจ jour et la solution serait devenue toxique.
CONCLUSION GENERALE
ย ย ย ย ย ย ย ย Lโanalyse des constituants organiques des feuilles brutes nous a permis de mettre en รฉvidence la prรฉsence des familles chimiques suivantes : les tanins, les stรฉrols insaturรฉs, les glucosides cardiotoniques, les polysaccharides, les alcaloรฏdes, les saponines, ainsi que les produits phรฉnoliques, triterpรฉnoรฏdiques et flavonoรฏdiques. Lโextraction liquide-liquide suivie des tests phytochimiques et des analyses chromatographiques des extraits issus du dรฉcoctรฉ et de lโinfusรฉ montrent que :
โข le dรฉcoctรฉ des feuilles sรจches (DS) contient la majoritรฉ des familles chimiques susmentionnรฉes en quantitรฉ abondante. Cette solution pourrait รชtre toxique.
โข Lโinfusion des feuilles ร lโรฉtat frais (IF) ne renferme que trรจs peu de composรฉs organiques. Cette solution ne sera pas convenable au traitement de la goutte.
โข Lโinfusรฉ des feuilles ร lโรฉtat sec (IS) et le dรฉcoctรฉ des feuilles ร lโรฉtat frais (DF) contiennent la majoritรฉ des composรฉs organiques mais en faible quantitรฉ.
Pour lโรฉtude des constituants minรฉraux, nous avons appliquรฉ les principes de lโentraรฎnement ร la vapeur pour les รฉlรฉments minรฉraux volatils comme lโazote et de la spectromรฉtrie dโabsorption (ou dโรฉmission) atomique pour les mรฉtaux. On a pu rรฉvรฉler de cette รฉtude que les feuilles de la plante sont riches en รฉlรฉments minรฉraux et oligo-รฉlรฉments. Une รฉtude comparative des trois รฉchantillons : dรฉcoctรฉ des feuilles fraรฎches (DF)- infusรฉ des feuilles sรจches (IS)-macรฉrรขt ร froid (MF) des feuilles sรจches est abordรฉe. Lโinfusรฉ des feuilles sรจches et le macรฉrรขt ร froid prรฉsentent des taux en รฉlรฉments minรฉraux plus รฉlevรฉs que le dรฉcoctรฉ des feuilles fraรฎches. Les ions potassium et magnรฉsium sont majoritaires dans ces trois solutions, les ions fer, cuivre et zinc se trouvent ร lโรฉtat de trace. De cet inventaire des constituants tout en tenant compte des rรดles respectifs des รฉlรฉments minรฉraux et en particulier des ions potassium, on peut confirmer lโeffet diurรฉtique de la plante, cโest le fond du traitement de la goutte De lโรฉtude รฉlectrochimique, lโรฉtude de pH en fonction du temps permet de conclure que les solutions prรฉparรฉes ร partir des feuilles fraรฎches (DF et IF) sont moins basiques que celles obtenues ร partir des feuilles sรจches (DS et IS) et que les dรฉcoctรฉs (DF et DS) sont moins basiques par rapport aux infusรฉs (IF et IS). Dโaprรจs lโรฉtude des pH des diffรฉrentes fractions (E-AqDF, E-AqDS, E AqIF et EAqIS,), on a pu tirer que, pour les feuilles fraรฎches, les composรฉs extraits par les solvants moins polaires tels le dichloromรฉthane et le butanol sont รฉgalement responsables de la basicitรฉ des solutions. Lโรฉtude de la conductivitรฉ en fonction du temps montre que les dรฉcoctรฉs et les infusรฉs se comportent diffรฉremment : au bout de deuxiรจme jour, la conductivitรฉ des dรฉcoctรฉs augmente tandis que pour les infusรฉs, une diminution de la conductivitรฉ est observรฉe pendant cette pรฉriode. Le dosage du dรฉcoctรฉ des feuilles fraรฎches (DF) permet de conclure que la solution se comporte comme une dibase le premier jour. Au bout de deuxiรจme jour, cette solution serait fermentรฉe due ร la prรฉsence des sucres rรฉducteurs rรฉvรฉlรฉs lors des tests phytochimiques. Ce phรฉnomรจne est marquรฉ par une diminution considรฉrable de pH. A partir du quatriรจme jour, la solution se comporte comme une monobase forte. Lors du dosage de lโinfusรฉ des feuilles sรจches (IS), on a pu tirer que cette solution est dibasique le premier jour, la basicitรฉ de la solution varie trรจs faiblement pendant les quatre premiers jours. Au-delร du septiรจme jour, on a une solution monobasique forte. Ces deux solutions (DF et IS) renferment :
โข des composรฉs organiques ร caractรจre basique comme les alcaloรฏdes et les flavonoรฏdes, probablement responsables de lโactivitรฉ biologique attendue.
โข des composรฉs basiques formรฉs ร partir des ions minรฉraux ayant un effet diurรฉtique.
Dโaprรจs ces diffรฉrentes รฉtudes, on a pu conclure que le dรฉcoctรฉ des feuilles fraรฎches est le mode de prรฉparation le plus appropriรฉ, cette solution doit รชtre renouvelรฉe chaque jour. Si on veut conserver la plante, lโinfusรฉ des feuilles sรจches pourrait รชtre administrรฉ, il peut รชtre conservรฉ pendant quatre jours. Par ailleurs, il est prรฉfรฉrable de ne pas stocker les feuilles sรจches trรจs longtemps. En effet, lโรฉtude comparative de la solution IS (2005) et la solution IS (2005 stockรฉ) permet de conclure que lors du stockage, les propriรฉtรฉs chimiques de lโinfusรฉ seraient modifiรฉes : augmentation de pH et diminution de la conductivitรฉ. Lโobjet de notre future investigation serait la dรฉtermination structurale des principes actifs de la plante. Des รฉtudes pharmacologiques devront complรฉter notre travail pour pouvoir รฉtudier la toxicitรฉ de la plante.
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Table des matiรจres
INTRODUCTION GENERALE
PREMIERE PARTIE : RAPPELS THEORIQUES
CHAPITRE I : PRINCIPES DES METHODES DโANALYSES UTILISEES
CHAPITRE I : PRINCIPES DES METHODES DโANALYSES UTILISEES
I-1 METHODES POUR LโANALYSE DES CONSTITUANTS ORGANIQUES
I-1-1 EXTRACTION : [7]
I-1-1-1 Extraction liquide โ liquide
I-1-1-2 Extraction solide โ liquide
I-1-2 TESTS PHYTOCHIMIQUES : [13] [15]
I-1-2-1 Tests des alcaloรฏdes
I-1-2-2 Tests des flavonoรฏdes
I-1-1-3 Tests des polyphรฉnols et des tanins
I-1-2-4 Test des stรฉroรฏdes et tรฉrpenoรฏdes
I-1-2-5 Test des saponines
I-1-2-6 Test des polysaccharides et des sucres rรฉducteurs
I-1-3 CHROMATOGRAPHIE : [1][7][14][2]
I-1-3-1 Dรฉfinition
I-1-3-2 Principe de la C.C.M
I-1-3-3 Polaritรฉ du systรจme dโรฉluant : [2]
I-1-3-4 Rapport frontal
I-1-3-5 Systรจme de rรฉvรฉlation
I-2 METHODES POUR LโANALYSE DES CONSTITUANTS MINERAUX
I-2-1 MINERALISATION : [1]
I-2-1-1 Principe
I-2-1-2 Appareillage
I-2-2 SPECTROMETRIE DโABSORPTION ATOMIQUE : [13]
I-2-2-1 Principe
I-2-2-2 La loi dโabsorption
I-2-2-3 Appareillage
I-3 METHODES POUR LES ETUDES ELECTROCHIMIQUES
I-3-1 NOTION SUR LโACIDE ET LA BASE : [6]
I-3-1-1 Dรฉfinition
I-3-1-2 Neutralisation acide base
I-3-1-3 Calcul de lโaciditรฉ et de lโalcalinitรฉ
I-3-2 TITRAGE pH-METRIQUE
I-3-3 TITRAGE CONDUCTIMETRIQUE
I-3-3-1 Notion sur la conductimรฉtrie
I-3-3-2 Dosage conductimรฉtrique
I-3-4 TITRAGE POTENTIOMETRIQUE
DEUXIEME PARTIE : TRAVAUX PERSONNELS
CHAPITRE II : RECHERCHE BIBLIOGRAPHIQUE
II-1- NOTION SUR LA PLANTE DENOMMEE AEF
II-2- TRAVAUX ANTERIEURS
II-3 NOTION SUR LA GOUTTE : [4][5][9][10]
II-3-1 DEFINITION
II-3-2 FORMES CLINIQUES DE LA GOUTTE
II-3-2-1 Forme typique : (goutte aigue)
II-3-2-2 Forme symptomatique de lโaccรจs goutteux
II-3-2-3 Forme รฉvolutive
II-3-3 TRAITEMENT DE LA GOUTTE
II-3-3-1 Traitement de lโaccรจs goutteux
II-3-3-2 Traitement hypo-uricรฉmiant
II-3-4 LโACIDE URIQUE
II-4 AUTRES PLANTES MEDICINALES UTILISEES POUR TRAITER LA GOUTTE [11][17][18]
II-5 ROLES DE QUELQUES COMPOSES MINERAUX SUR LโORGANISME HUMAIN [3]
II-5-1 LE POTASSIUM
II-5-2 LE CUIVRE
II-5-3 LE PHOSPHORE
II-5-4 LE CALCIUM
II-5-5 LE FER
II-5-6 LE MAGNESIUM
CHAPITRE III : ETUDE DES CONSTITUANTS ORGANIQUES DES FEUILLES DE LA PLANTE DENOMMEE AEF
III-1 INVENTAIRES DES CONSTITUANTS ORGANIQUES
III-1-1 ETUDE COMPARATIVE DES FEUILLES BRUTES FRAICHES ET SECHES DE LA PLANTE AEF
III-1-1-1 Prรฉparation de lโextrait รฉthanolique
III-1-1-2 Traitement par lโeau du rรฉsidu issu de lโextraction รฉthanolique
III-1-1-3 Rรฉsultats des tests phytochimiques
III-1-2 TRAITEMENT DU DECOCTE ET DE LโINFUSE ISSUS RESPECTIVEMENT DES FEUILLES SECHES ET DES FEUILLES FRAICHES
III-1-2-1 Prรฉparation des solutions
III-1-2-2 Extraction liquide-liquide
III-1-3 INTERPRETATIONS
III-1-4 CONCLUSION
III-2 METHODE CHROMATOGRAPHIQUE
CHAPITRE IV : ETUDE DES CONSTITUANTS MINERAUX DES FEUILLES DE LA PLANTE DENOMMEE AEF
IV-1 INVENTAIRE DES CONSTITUANTS MINERAUX DE FEUILLES DE LA PLANTE AEF
IV-1-1 POURCENTAGE EN AZOTE TOTAL
IV-1-1-1 Minรฉralisation (cf partie expรฉrimentale)
IV-1-1-2 Extraction de lโazote minรฉral (cf partie expรฉrimentale)
IV-1-1-3 Rรฉsultats
IV-1-2 CONCENTRATION EN PHOSPHORE
IV-1-2-1 Rรฉaction de complexation du phosphate
IV-1-2-2 Mesure de lโabsorbance du phosphore
IV-1-2-3 Prรฉparation de la solution (cf partie expรฉrimentale)
IV-1-2-4 Calculs et Rรฉsultats
IV-1-3 CONCENTRATION EN CATIONS
IV-1-3-1 Rรฉsultats
IV-1-4 INTERPRETATIONS
IV-2 ETUDE COMPARATIVE DES TROIS SOLUTIONS : DECOCTE DES FEUILLES FRAICHES (DF), INFUSE DES FEUILLES SECHES (IS) ET MACERAT A FROID DES FEUILLES SECHES (MF)
IV-2-1 DETERMINATION DE LA CONCENTRATION DES ELEMENTS MINERAUX DU DECOCTE DES FEUILLES FRAICHES (DF)
IV-2-2 DETERMINATION DE LA CONCENTRATION DES ELEMENTS MINERAUX DE LโINFUSE DES FEUILLES SECHES (IS)
IV-2-3 DETERMINATION DE LA CONCENTRATION DES ELEMENTS MINERAUX DU MACERAT A FROID (MF)
IV-3 INTERPRETATIONS ET CONCLUSIONS
CHAPITRE V : ETUDES ELECTROCHIMIQUES DES DIFFERENTS EXTRAITS DU DECOCTE ET DE LโINFUSE DES FEUILLES SECHES ET DESย FEUILLES FRAICHES DE LA PLANTE DENOMMEE AEF
V-1 CARACTERISTIQUE ACIDO-BASIQUE DES FEUILLES SECHES ET DES FEUILLES FRAICHES DE LA PLANTE
V-1-1 ETUDE DU pH EN FONCTION DU TEMPS
V-1-2 ETUDE DES FRACTIONS ISSUES DU DECOCTE ET DE LโINFUSE
V-1-3 COMPARAISON DES DIFFERENTS EXTRAITS DES FEUILLES FRAICHES ET DES FEUILLES SECHES
V-1-4 ETUDE DE LA CONDUCTIVITE EN FONCTION DU TEMPS
V-1-5 ETUDE COMPARATIVE DES DEUX SOLUTIONS : INFUSES DES FEUILLES SECHES
V-1-6 CONCLUSION
V-2 TITRAGE pH-METRIQUE
V-2-1 TITRAGE DU DECOCTE DES FEUILLES FRAICHES DF
V-2-2 TITRAGE DE LโINFUSE DES FEUILLES SECHES IS
V-2-3 INTERPRETATIONS DES RESULTATS
V-2-4 CONCLUSION
CONCLUSION GENERALE
PARTIE EXPERIMENTALE
IV-1 MINERALISATION
VI-2 TITRAGE ACIDE (EXTRACTION DE LโAZOTE MINERAL)
VI-3 PREPARATION DES SOLUTIONS
VI-4 PREPARATION DU DECOCTE DES FEUILLES FRAICHES (DF)
VI-5 PREPARATION DE LโINFUSE DES FEUILLES SECHES (IS)
VI-6 PREPARATION DU MACERAT A FROID
BIBLIOGRAPHIE
ANNEXES
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