Histologie du seinย
Dโun point de vue histologique, le sein se compose de deux parties sรฉparรฉes par une lame basale : une partie รฉpithรฉliale fibreuse constituรฉe ร la fois par les lobules et les canaux galactophores et une partie stromale composรฉe de tissus conjonctifs et adipeux permettant la sรฉparation de chaque lobe et de chaque canal (Hassiotou and Geddes, 2013).
La composante รฉpithรฉliale
La composante รฉpithรฉliale des canaux et des lobules est formรฉe suite ร la diffรฉrenciation des cellules souches mammaires (MaSCs). Ces cellules multipotentes sont localisรฉes dans la partie infรฉrieure de la composante รฉpithรฉliale au contact de la lame basale . Les MaSCs sont ร lโorigine des progรฉniteurs luminaux et myoรฉpithรฉliaux et sont indispensables ร la formation de lโarborescence de la glande mammaire (Shackleton et al., 2006; Visvader and Stingl, 2014).
Les progรฉniteurs luminaux se diffรฉrencient en cellules canalaires et alvรฉolaires. Les cellules canalaires forment la couche de cellules internes des canaux alors que les cellules alvรฉolaires forment celle des lobules (Hassiotou and Geddes, 2013; Visvader and Stingl, 2014).
โ Les cellules canalaires prรฉsentent une expression hรฉtรฉrogรจne des rรฉcepteurs aux ลstrogรจnes, une partie lโexprime alors que lโautre non (Visvader and Stingl, 2014). Ces cellules prรฉsentent รฉgalement une forte expression du syndรฉcane-1 qui est un protรฉoglycane transmembranaire fortement exprimรฉ dans leur partie baso-latรฉrale (Stanley et al., 1999).
โ Les cellules alvรฉolaires sont elles-mรชmes capables de se diffรฉrencier en lactocytes afin de permettre la synthรจse du lait lors de la lactation (Hassiotou and Geddes, 2013). Ces cellules nโexpriment pas le syndรฉcane-1 (Stanley et al., 1999) et sont globalement ER-, nโexprimant pas le rรฉcepteur aux ลstrogรจnes (Sleeman et al., 2007; Visvader and Stingl, 2014).
Les progรฉniteurs myoรฉpithรฉliaux se diffรฉrencient en cellules myoรฉpithรฉliales. Ces cellules constitutives de la couche externe des canaux et des lobules ont la particularitรฉ dโรชtre contractiles (Hassiotou and Geddes, 2013; Visvader and Stingl, 2014).
La lame basaleย
La lame basale sรฉpare la composante รฉpithรฉliale de la composante stromale. Elle est majoritairement composรฉe de fibres de collagรจne de type IV , de laminine, de nidogรจne et de perlecan (Insua-Rodrรญguez and Oskarsson, 2016).
Il apparaรฎt รฉgalement que lโimprรฉgnation hormonale lors de la grossesse et du cycle menstruel modifie les caractรฉristiques de la lame basale (Ferguson et al., 1990; Hassiotou and Geddes, 2013). Au cours de la carcinogenรจse, la lame basale subit des modifications de sa composition (Albrechtsen et al., 1981; Ferguson et al., 1990; Ioachim et al., 2002). Le collagรจne IV peut par exemple รชtre dรฉgradรฉ par diffรฉrentes enzymes dont les mรฉtalloprotรฉinases et les cathepsines (Insua-Rodrรญguez and Oskarsson, 2016). Ainsi, lโaugmentation de lโexpression de ces enzymes protรฉolytiques induit le remodelage de la lame basale qui devient permรฉable aux cellules mรฉsenchymales lors de la TEM.
La composante stromale
La composante stromale de la glande mammaire est constituรฉe par de nombreuses cellules telles que les adipocytes, les fibroblastes, les cellules endothรฉliales ainsi que les cellules impliquรฉes dans lโimmunitรฉ (macrophages et leucocytes) mais aussi par des fibres nerveuses et des vaisseaux sanguins et lymphatiques (Hassiotou and Geddes, 2013; InsuaRodrรญguez and Oskarsson, 2016).
Les cellules mรฉsenchymateuses ne sont pas ร lโorigine du cancer du sein cependant elles sont impliquรฉes dans le dรฉveloppement des carcinomes mammaires. Par exemple, les adipocytes peuvent synthรฉtiser des ลstrogรจnes, une hormone sexuelle ayant un rรดle oncogรฉnique, et permettre lโinitiation et la progression tumorale. Le systรจme lymphatique et le systรจme veineux sont quant ร eux responsables de la dissรฉmination mรฉtastatique. Le microenvironnement cellulaire est รฉgalement composรฉ dโรฉlรฉments de la matrice extracellulaire (fibronectine, fibres de collagรจnes (I, III, V), protรฉoglycanes (dรฉcorine, biglycane et syndรฉcane)) et par leurs enzymes associรฉes. Lors de la tumorigenรจse et de la progression tumorale, des changements de la composition de la matrice extra-cellulaire sont observรฉs (Insua-Rodrรญguez and Oskarsson, 2016).
Le remodelage physiologique du seinย
Tout au long du cycle de la vie dโune femme, sous le contrรดle des hormones, la glande mammaire subit des modifications lui permettant dโachever la mammogenรจse et de la rendre fonctionnelle. Lโimprรฉgnation hormonale du sein contrรดle en partie : le dรฉveloppement de la glande mammaire ร la pubertรฉ, son remodelage lors de la grossesse et sa rรฉgression (appelรฉ involution) ร la mรฉnopause . De plus, ร chaque cycle menstruel, le sein peut subir un remodelage (Hassiotou and Geddes, 2013; Russo and Russo, 2006).
ร la naissance, la structure du sein est rudimentaire. Elle ne comporte aucune structure acino-lobulaire mais prรฉsente 15 ร 25 canaux lactifรจres par sein (chez le garรงon et la fille). ร ce stade et jusquโร lโallaitement, la grande mammaire ne prรฉsente aucune fonctionnalitรฉ (Hassiotou and Geddes, 2013; Roux, 2013).
ร la pubertรฉ, la glande mammaire se dรฉveloppe chez les filles sous lโinfluence des hormones stรฉroรฏdiennes (17ฮฒ-ลstradiol, progestรฉrone) mais, aussi des hormones gonadotropes (lutรฉinisante (LH) et folliculo-stimulante (FSH)). Lโaugmentation du tissu adipeux sโaccompagne dโun accroissement du volume des seins. Les canaux se dรฉveloppent et se ramifient (segmentation galactophorique), ร leur extrรฉmitรฉ apparaรฎt des bourgeons terminaux constituรฉs de cellules รฉpithรฉliales. La maturation de ces bourgeons, dite maturation ducto-lobulaire, permet la formation dโacini non fonctionnels. ร ce stade, les acini se regroupent (groupe de 11) pour former des lobules de type 1 qui sont peu diffรฉrenciรฉs (Hassiotou and Geddes, 2013; Roux, 2013; Russo and Russo, 2006).
ร partir de lโรขge adulte, les lobules de type 1 se diffรฉrencient en lobules de type 3. Chacun dโentre eux est formรฉ par le regroupement dโapproximativement 80 acini, cependant, ils nโont pas de fonction sรฉcrรฉtoire.
Lors de la grossesse, les seins atteignent le stade le plus abouti (lobules de type 4). Ils acquiรจrent leur fonctionnalitรฉ notamment sous le contrรดle du 17ฮฒ-ลstradiol (E2) et de la progestรฉrone (synthรฉtisรฉs par le placenta). Avant lโaccouchement, la prolactine active la lactogenรจse qui se met ainsi en place dans les acini. Ces derniers synthรฉtisent et stockent des vacuoles de sรฉcrรฉtion constituรฉes de lipides, glucides et protรฉines. Lโocytocine permet quant ร elle lโexcrรฉtion du lait en induisant la contraction des cellules myoรฉpithรฉliales. Il a รฉtรฉ montrรฉ que les femmes ayant eu une maturation complรจte des lobules lors de la grossesse et de la lactation pouvait bรฉnรฉficier dโun effet protecteur contre lโapparition et le dรฉveloppement dโune tumeur mammaire (Hassiotou and Geddes, 2013; Roux, 2013; Russo and Russo, 2006).
ร la fin de lโallaitement, le lait restรฉ dans les canaux induit lโinvolution de la glande mammaire. Les cellules sรฉcrรฉtrices rentrent en apoptose, les diffรฉrentes structures lobulaires (de type 4) et canalaires composant le sein rรฉgressent au profit du tissu adipeux. La glande mammaire perd ainsi sa fonction sรฉcrรฉtrice jusquโร une prochaine grossesse (Hassiotou and Geddes, 2013; Roux, 2013).
ร la mรฉnopause, lโarrรชt de la fonction ovarienne entraรฎne une diminution de la concentration plasmatique en progestรฉrone et 17ฮฒ-ลstradiol (90 %). Cependant, la baisse de la concentration en E2 ne se reflรจte pas dans le sein. Cette absence de diminution peut รชtre expliquรฉe par une synthรจse endogรจne dโลstradiol et par lโapport dโลstradiol sรฉrique (Geisler, 2003). La composante รฉpithรฉliale de la glande mammaire fibreuse diminue (apoptose des cellules รฉpithรฉliales) au profit du tissu adipeux. Les canaux galactophores sont maintenus tandis que les acini et les lobules rรฉgressent (Russo and Russo, 2006).
Malgrรฉ un rรดle majeur des hormones sexuelles (ลstrogรจnes et progestรฉrone), les hormones de croissance ainsi que les glucocorticoรฏdes sont nรฉcessaires au dรฉveloppement de la glande mammaire. Par exemple lors de la pubertรฉ, lโIGF-1 (insulin-like growth factor-1) et lโEGF (epidermal growth factor) permettent le dรฉveloppement des canaux galactophores en stimulant la prolifรฉration des cellules canalaires (Stull et al., 2002).
|
Table des matiรจres
Introduction
Chapitre 1 : Le cancer du sein
Le tissu sain
I.1 Anatomie du sein
I.2 Histologie du sein
I.3 Le remodelage physiologique du sein
Le cancer du sein
II.1 Prรฉvalence du cancer du sein
II.2 Etiologie et facteurs de risque
II.3 Caractรฉristiques gรฉnรฉtiques des tumeurs mammaires
II.1 Caractรฉrisation et classification des tumeurs mammaires
Chapitre 2 : La signalisation ลstrogรฉnique dans la carcinogenรจse mammaire
Les ลstrogรจnes et la signalisation ลstrogรฉnique
I.1 Les ลstrogรจnes
I.2 Les rรฉcepteurs aux ลstrogรจnes
I.3 La signalisation ลstrogรฉnique
I.4 Rรฉgulation transcriptionnelle
Implication des ลstrogรจnes dans la carcinogenรจse mammaire
II.1 La carcinogenรจse mammaire
II.2 Implication dโERฮฑ dans la carcinogenรจse mammaire
II.3 Dรฉrรฉgulation des acteurs de la signalisation ลstrogรฉnique dans le cancer du sein
II.4 Traitement du cancer et hormonothรฉrapie
Chapitre 3 : Le syndรฉcane-1
Gรฉnรฉralitรฉs
Expression du SDC-1
II.1 Le gรจne
II.2 Expression du SDC-1 au cours de lโembryogenรจse
II.3 Rรฉgulation transcriptionnelle du SDC-1
II.4 Rรฉgulation post-transcriptionnelle du SDC-1
Le SDC-1 : un protรฉoglycane ร hรฉparane sulfate
III.1 La partie glucidique du SDC-1
III.2 Lโaxe protรฉique : structure et fonction
Le clivage de lโectodomaine : ยซ shedding ยป du SDC-1
IV.1 Gรฉnรฉralitรฉs
IV.2 Lโhรฉparanase
IV.3 Clivage de lโaxe protรฉique : les protรฉases matricielles
La localisation nuclรฉaire du SDC-1
V.1 Mรฉcanisme
V.2 Rรดle
Le syndรฉcane-1 et le cancer du sein
Objectifs
Matรฉriel et Mรฉthodes
Liste de fournisseurs
Culture cellulaire
II.1 Lignรฉes cellulaires
II.2 Entretien des cellules
II.3 Privation des cellules et traitements
Analyse des messagers
III.1 Extraction des ARN totaux
III.2 Dosage et รฉvaluation qualitative des ARN extraits
III.3 Digestion de lโADN bactรฉrien
III.4 Transcription inverse
III.5 PCR en temps rรฉel
Analyse protรฉique
IV.1 Extractions des protรฉines totales
IV.2 Dosage protรฉique Bradford/ prรฉparation des รฉchantillons
IV.3 Western blot
IV.4 Immunocytochimie
IV.5 Microscopie รฉlectronique en transmission
IV.6 Analyse du clivage protรฉolytique du SDC-1 par cytomรฉtrie en flux
Tests cellulaires
V.1 Etude de la prolifรฉration cellulaire : coloration au cristal violet
V.2 Test de migration par blessure
Analyse du cycle cellulaire en cytomรฉtrie en flux
Analyse statistique
Table des matiรจres
Rรฉsultats
Conclusion