Soutenance mémoire
Inoculum et inoculation
Prélèvements et analyses
Techniques de prélèvements
Prélèvement de sang
– Préparation
– Contention de l’animal en décubitus latéral à l’aide de trois lacs (deux pour les membres et un pour la tête) désinfectés à l’eau de Javel.
– Nettoyage à l’alcool de toute la zone du cou pour retirer les poils et la matière organique.
– Nettoyage et désinfection de la zone de prélèvement (zone rasée), du centre vers l’extérieur, par alternance de Vétédine® savon et d’alcool (quatre passages). Un temps de contact de la Vétédine® d’environ 30 secondes a été respecté à chaque passage.
– Application de Vétédine® solution sur la zone de prélèvement.
– Réalisation
– La personne qui réalise le prélèvement porte des gants à usage unique sur lesquels est appliquée de la Vétédine solution®. La réalisation du prélèvement se fait avec une aiguille 20G et une seringue de 20 mL, tout en restant dans un cône stérile produit par un chalumeau portable.
– Un second opérateur réalise la compression de la veine jugulaire et fournit le matériel.
– 20 mL de sang sont prélevés.
– Changement d’aiguille dans le cône stérile et injection de 10 à 15 mL de sang dans un milieu de culture Hémoline performance diphasique® (Biomérieux). Le flacon d’Hémoline se compose de deux milieux, d’une part 40 ml de bouillon additionné d’anticoagulant (polyanéthosulfonate de sodium, SPS) et enrichi en facteurs de croissance (NAD, hémine, Vit. B6, purines, pyrimidines…) et d’autre part une gélose recouvrant une des faces du flacon.
Une atmosphère de CO2 est en contact direct avec le bouillon et la gélose. Il s’agit d’un milieu aérobie, la recherche des anaérobies strictes n’a pas été effectuée.
– Le flacon est immédiatement placé à l’étuve à 37 °C.
– Le reste du sang est déposé dans des tubes héparinés ou EDTA pour mesure des gaz sanguins et/ou une numération-formule.
– Chaque série de prélèvements est réalisée alternativement sur l’une des deux veines jugulaires.
Prélèvement d’urine
Les mêmes précautions opératoires que pour l’hémoculture ont été appliquées.
– L’animal est couché en décubitus dorsal et contenu par des lacs.
– La même préparation de désinfection est réalisée sur la zone de prélèvement correspondant dans ce cas à un carré de 20 cm2 centré sur la ligne médiane de l’abdomen caudal.
– Le prélèvement est réalisé par un opérateur avec des gants non stériles imbibés de Vétédine solution®, avec une aiguille 20 G (diamètre 0,90 mm et longueur 40 mm). Celle-ci est enfoncée jusqu’à la garde, 1 cm crânialement à la symphyse pubienne sur la ligne blanche, perpendiculairement à l’axe sagittal de l’animal et l’urine qui s’écoule spontanément est collectée à la seringue avec une aspiration douce.
– Un second prélèvement est envisagé en cas d’échec du premier.
– Après changement d’aiguille dans un cône stérile, l’urine est injectée dans un tube sec dont le bouchon est désinfecté à l’alcool, essuyé puis passé à la flamme. Le prélèvement est alors placé soit dans la glace et envoyé directement au laboratoire de bactériologie soit au réfrigérateur à 4°C en attente de l’envoi.
– La difficulté éventuelle du prélèvement est notifiée.
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Guide du mémoire de fin d’études avec la catégorie Médecine Vétérinaire |
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Table des matières
Introduction
1. Bactéries impliquées dans les septicémies du veau
2. Présentation et classification d’Escherichia coli
3. Facteurs de virulence des souches septicémiques
4. Epidémiologie descriptive et analytique
5. Facteurs favorisants de la septicémie
6. Tableau clinique et diagnostic différentiel
7. Bactériémie et bactériurie chez l’Homme
8. Détection de la bactériurie par la mise en évidence d’une activité catalase (test Uriscreen)
9. Problématique, hypothèses et objectifs
I. Matériels et méthodes
I. Animaux
II. Locaux, alimentation
III. Inoculum et inoculation
1. Description de la souche
2. Préparation de l’inoculum
3. Inoculation
IV. Evolution clinique
V. Prélèvements et analyses
1. Techniques de prélèvements
a. Prélèvements de sang
b. Prélèvements d’urine
c. Prélèvements de fécès et d’organes
2. Nature et séquence des analyses
a. Hématologie
b. Biochimie
c. Bactériologie
d. Test Uriscreen
e. Biochimie urinaire
VI. Interprétation des résultats
II. Résultats
I. Statut des animaux à l’entrée
II. Evolution clinique
III. Hématologie et biochimies sanguine et urinaire
1. Hématologie
2. Biochimie sanguine
3. Biochimie urinaire
IV. Bactériologie
1. Bactériémie : hémoculture et bactériologie du foie et du rein
a. Veaux inoculés
b. Veaux témoins
2. Bactériurie et association avec la bactériémie
3. Bactériologie des fécès
V. Test Uriscreen
III. Discussion
I. Matériels et méthodes
1. Inclusion des animaux
2. Alimentation des veaux
3. Technique d’inoculation
4. Prélèvements
a. Technique de prélèvement sanguin et urinaire
b. Technique d’isolement et d’identification bactérienne
II. Signes cliniques
III. Hématologie et biochimie sanguine et urinaire
1. Hématologie
2. Biochimie sanguine
3. Biochimie urinaire
IV. Bactériémie et septicémie
V. Bactériurie et bactériémie
1. Lien entre septicémie et bactériurie, quelque soit la bactérie
2. Lien entre septicémie et bactériurie, bactérie par bactérie
3. Bilan
VI. Test Uriscreen
Conclusions
Bibliographie
Annexes
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