Soutenance mémoire
Candida parapsilosis
Cette espèce se développe entre 35°C et 37°C. ces colonies atteignent la maturité en trois jours sur Sabouraud Dextrose Agar et sont de couleurs blanches à crèmes,aspect lisses, globuleuses et quelques fois dentelées dans leur apparence. Sur un milieu contenant des sels de tetrazolium, cette levure donne des colonies rouges (Bouchara et al., 2010). Au microscope, sur un milieu neuf et au cours des manipulations de routine, les levures sont de forme ovale avec 3-4 x 5-8 µm. Sur milieu Agar contenant le jus de maïs et le tween 80, cette espèce présente des pseudo-hyphes relativement courts et incurvés. Occasionnellement, les pseudo-hyphes de grandes tailles sont produits (Ellis et al., 2007; Bouchara et al., 2010).
Caractéristiques particulières : Candida parapsilosis est responsable de plusieurs types d’infection chez l’homme. Elle est souvent incriminée dans le muguet buccal, les endocardites, les fongémies, les endophtalmites, les arthrites et les péritonites. Ces infections sont très souvent la conséquence d’une procédure médicale invasive (transplantation, dialyse du péritoine…) ou à travers les prothèses et le matériel médical mal stérilisé (van Asbeck et al., 2009). C’est le second après Candida albicans dans les Candidoses systémiques chez les nouveaux nés ayant un très faible poids. Une étude menée en Espagne en 2006 montre que cette espèce est responsable de 23% des Candidoses mais le taux de mortalité lié à ce pathogène est supérieur à celui lié à Candida albicans soit 50% des personnes infectées (Cheng et al., 2005).
Rôle physiologique des radicaux libres
Normalement, Les radicaux libres jouent un rôle bénéfique dans le fonctionnement des organismes vivants. En effet, le NO et l’O2- agissent positivement dans le fonctionnement normal du rein et du tissu vasculaire. De plus, le NO produit par les neurones sert de neurotransmetteur tandis que le NO produit par les macrophages sert de médiateur pour la réponse immunitaire (Favier, 2003). De façon globale, les réactions biochimiques sont des séries de réaction d’oxydo-réduction. En effet, la synthèse d’énergie au niveau de la mitochondrie est une phosphorylation oxydative de l’ADP en ATP. D’autre part, la détoxification des xénobiotiques dans l’organisme par le cytochrome P450 est une oxydoréduction avec production d’un métabolite non toxique. Certains radicaux libres comme l’ion super-oxyde et le peroxyde peuvent agir comme les messagers secondaires. De plus certains radicaux libres agissent en modulant les fonctions cellulaires. C’est le cas du peroxyde qui peu mimer le facteur de croissance de l’insuline (Devasagayam et al., 2004; Favier, 2003). La toxicité des radicaux libres résulte d’une surproduction ou de l’emballement des mécanismes physiologiques tels que les inflammations chroniques ou l’exposition à des sources exogènes comme les U.V., le tabagisme et l’alcoolisme. Cette surproduction va engendrer un déséquilibre entre les défenses anti-oxydantes de l’organisme et ces espèces oxydantes. Le déséquilibre ainsi produit plonge l’organisme dans un état de stress dit stress oxydant (Favier, 2003). Face à ces attaques sans cesse croissantes des radicaux libres, pour se protéger de leurs effets délétères, l’organisme a développé plusieurs systèmes de défense dit antioxydants.
Les leucotriènes
Les leucotriènes sont les métabolites produits par action des Lipooxygénases sur l’acide arachidonique. Contrairement aux cyclooxygénases il existe plusieurs types de lipo-oxygénases, mais seul l’isomère 5-lipo-oxygénase est capable de produire la 5-HPETE qui après maturation va produire les leucotriènes A4 (LTA4). Par maturation ces dernières vont donner les leucotriènes B4. Les LTA4 peuvent aussi donner de façon séquentielle les leucotriènes C4, D4 et E4. Les leucotriènes sont les médiateurs de la réponse inflammatoire aiguë et chronique. En effet, ils agissent sur la perméabilité membranaire favorisant ainsi le phénomène de diapédèse. Ce sont des médiateurs chimiotactiques, proinflammatoires qui agissent par attraction des éosinophiles, des neutrophiles et des monocytes sur le site de l’inflammation (Luo et al., 2003 ;Peters-golden et Henderson, 2007; Montuschi, 2010).
Les Anti-Inflammatoires stéroïdiens (AIS)
Les anti-inflammatoires stéroïdiens sont principalement les composés médicamenteux dérivés du cortisol, un glucocorticoïde surrénalien. Les glucocorticoïdes agissent au niveau post et pré-transcriptionnel de la synthèse des cytokines pro-inflammatoires en se fixant sur les récepteurs cytosoliques spécifiques aux glucocorticoïdes. Une autre voie d’inhibition consiste à induire la fixation d’une Leucine terminale ce qui a pour conséquence de changer la nature des polypeptides pro-inflammatoires. Ces glucocorticoïdes n’agissent pas seulement au niveau de la synthèse des médiateurs de l’inflammation mais aussi au niveau des cellules cytokine-sensibles. Cette action se fait par interférence sur les récepteurs de cytokines sur les cellules sensibles. Cette inhibition conduit à une faible production des acteurs cellulaires de la réponse inflammatoire. Elles inhibent aussi la production des prostaglandines et des leucotriènes en induisant la synthèse de la lipocortine1. Les glucocorticoïdes inhibent aussi chez certaines cellules la production des facteurs transformant de croissance. De plus, elles réduisent la fixation des molécules sur le site de reconnaissance d’antigène limitant par-là la reconnaissance du non soi par les cellules immunitaires. Ce concert d’inhibition justifie la grande efficacité de ces médicaments. (Singh et al., 2004).
|
Table des matières
INTRODUCTION
I. GENERALITES SUR LES CHAMPIGNONS
I.1. Définition et Morphologie
I.2.Champignons et Mycoses
I.2.1. Candida spp et les Candidoses
I.2.1.1. Description et Habitat
I.2.1.2.Pathogénie
I.2.1.3. Candida albicans
I.2.1.4. Candida glabrata
I.2.1.5.Candida krusei
I.2.1.6. Candida parapsilosis
I.2.1.7. Candida tropicalis
I.2.2.Cryptococcus et les Cryptococcoses
I.2.2.1. Description et Habitat
I.2.2.2. Pathogénie
I.2.2.3. Cryptococcus néoformans
I.3. Les antifongiques et leur mode d’action
I.3.1.Définition
I.4. Quelques antibiotiques utilisés dans le traitement des mycoses
I.2. OXYDATION ET INFLAMMATION
I.2.1. Généralités sur les oxydants et les antioxydants
I.2.1.1. Définition
I.2.1.2. Les molécules responsables des oxydations
I.2.1.3.Rôle physiologique des radicaux libres
I.2.1.4. Les antioxydants
I.2.1.5.2.Classification des antioxydants
I.2.2. L’Inflammation
I.2.2.1.Définition
I.2.2.2.Les médiateurs de l’inflammation
I.2.2.3. Les Anti-inflammatoires.
I.3. GENERALITE SUR LES PLANTES ETUDIEES: LE GENRE OCIMUM
I.3.1. Description
I.3.3. Les Huiles essentielles du genre Ocimum
I.3.3. Ocimum basilicum Linnaeus
I.3.3.1. Noms usuels
I.3.3.2. Quelques appellations traditionnelles
I.3.3.3. Synonymes
I.3.3.4. Botanique
I.3.3.5. Ethnobotanique et Pharmacologie
I.3.3.5. Les huiles essentielles de Ocimum basilicum Lin
I.3.4. Ocimum canum Linnaeus
I.3.4.1. Noms usuels
I.3.4.2. Appellations traditionnelles
I.3.4.3. Synonymes
I.3.4.4. Botanique
I.3.4.5. Ethnobotanique et Pharmacologie
I.3.4.6. Les huiles essentielles de Ocimum canum Lin
I.3.5. Ocimum gratissimum Linnaeus
I.3.5.1. Noms usuels
I.3.5.2. Appellations traditionnelles
I.3.5.3. Synonymes
I.3.5.4. Botanique
I.3.5.5. Ethnobotanique et Pharmacologie
I.3.5.6. Les huiles essentielles de Ocimum gratissimum Lin
I.3.6. Ocimum urticaefolium Linnaeus
I.4 REVUE SUR L’ETUDE DES COMBINAISONS
I.4.1.Définition du concept
I.4.2.Isobole par la main
I.4.3. Produit Fractionnel de Weeb
I.4.4. Calcul des Indexes d’interaction
I.4.5. Méthode de l’effet médian de Chou et Talalay (1984)
I.4.6. Méthode de Berembaum
I.4.7. La méthode de Prichard et Chipman (Prichard et Shipman, 1990)
I.4.8. Les plans d’expériences
I.4.8.1.Les plans factoriels complets
I.4.8.2.Les plans en composite central
I.4.8.3.Le plan de Box-Behnken
I.4.8.4.Le plan de Doehlert
I.4.9. Les optimisations des réponses multiples
II.1.CADRE D’ETUDE.
II.2. MATERIEL ET METHODES
II.2.1. MATERIEL BIOLOGIQUE
II.2.1.1. Matériel végétal
II.2.2.2. Huile des graines de Linum usitatissimum
II.2.2.3. Matériel fongique
II.2.3. METHODES
II.2.3.1. Extraction des huiles essentielles
II.2.3.1.1. Principe
II.2.3.1.2.Méthodologie
II.2.3.2. Analyse de la composition chimique des huiles essentielles
II.2.3.2.1. Chromatographie en phase gazeuse et tandem Chromatographie en Phase Gazeuse couplé à la Spectrométrie de Masse
II.2.3.2.2. La Spectroscopie Infrarouge Moyen
II.3.3. Evaluation de l’activité antifongique
II.3.3.2. Evaluation de la Fongicidie par la méthode au Bleue de méthylène
II.3.3.3. Combinaison des huiles essentielles
II.3.3.4. Les plans d’expérience
II.3.3.5. Combinaison des réponses multiples
II.3.3.5. Détermination de la cinétique de mortalité des levures
II.3.4. Activité anti radicalaire
II.3.4.1. Activité sur le radical DPPH
II.3.4.2. Activité sur le radical hydroperoxide (H2O2)
II.3.4.3. Activité sur les radicaux Oxyde nitrique (NO) et dioxyde nitrique (NO2)
II.3.5. Effet protecteur sur l’huile des graines de Lin
II.3.5.1.Principe
II.3.4.2. Méthode
II.3.5.3.L’analyse spectroscopique
II.3.5.4. La spectrophotométrie
II.3.5.5. La titrimétrie
II.3.6. Activité sur la cyclooxygénase 1 et 2
II.3.6.1. Principe
II.3.6.2. Méthode
II.4. ANALYSES STATISTIQUES
III. RESULTATS ET DISCUSION
III.1. RESULTATS
III.1.1. Rendement d’extraction
III.1.2. COMPOSITION CHIMIQUE DES HUILES ESSENTIELLES
III.1.2.1. Etude de la composition chimique par CPG et CPG/SM
III.1.2.2. L’analyse Infrarouge des huiles essentielles d’Ocimum
III.1.3.1. Screening de l’activité sur les isolats de levure
III.1.3.3. Détermination des concentrations minimales inhibitrices par coloration au bleu de méthylène
III.1.3.4. Combinaison des huiles essentielles par la méthode de l’échiquier
III.1.3.5. Combinaisons des huiles essentielles utilisant les plans d’expériences
III.1.4. ACTIVITE ANTIOXYDANTE DES HUILES ESSENTIELLES
III.1.4.1. Activités anti-radicalaires
III.1.4.2. Activités protectrice de l’huile de lin
III.1.5. ACTIVITE ANTI-INFLAMMATOIRE DES HUILES ESSENTIELLES
III.1.5.1. Activité inhibitrice des huiles essentielles sur la cyclo-oxygénase 1
III.1.5.2. Activité inhibitrice des huiles essentielles sur la cyclooxygénase 2
III.1.2.3. Pharmacologie des combinaisons optimisées des Huiles essentielles
III.2. DISCUSSION
CONCLUSION
PERSPECTIVES
RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
ANNEXES
Télécharger le rapport complet
