Extraction par les ultrasons
Matรฉriel vรฉgรฉtal utilisรฉย
Le matรฉriel vรฉgรฉtal de Lavandual.Stoechas.L a รฉtรฉ collectรฉ au cours de la phase de floraison sur le jardin expรฉrimental de lโINPMA de la rรฉgion de Taounate. Le matรฉriel vรฉgรฉtal a รฉtรฉ identifiรฉ, sรฉchรฉ ร 40ยฐC dans lโรฉtuve et broyรฉ.
ย Protocole expรฉrimentaleย
Lโextraction de la lavande ร รฉtรฉ effectuรฉe par la mรฉthode de sonication ร lโaide dโun sonicateur ร bain dโeau figure 13 (Plusieurs รฉtudes effectuรฉes ont montrรฉes une grande efficacitรฉ de la sonication vis-ร -vis dโautres mรฉthodes dโextraction comme lโextraction par soxhlet).
Figure 13 sonicateur ร bain dโeau
Lโextraction assistรฉe par ultrasons
๏ง Dรฉlipidation des รฉchantillons
La dรฉlipidation des รฉchantillons est nรฉcessaire dans cette รฉtude parce que leur contenu en lipides pourra fausser les rรฉsultats du dosage des polyphรฉnols aprรจs, alors on procรฉdรฉ comme suit
๏ง Environ 15g de matiรจre vรฉgรฉtale broyรฉe est placรฉe dans une bouteille ร bouchon de 500 ml de verre.
๏ง Ajouter 150ml de n-hexane, boucher soigneusement et placer รฉventuellement pendant 45 minutes dans un bain ร ultrasons ร une frรฉquence de 35kHz, une puissance de 20 w et une tempรฉrature de 20 Cยฐ.
๏ง Aprรจs avoir รฉtรฉ extrait, le mรฉlange va รชtre filtrรฉ ร travers un papier Whatman, et on รฉlimine le solvant.
๏ง La matiรจre de plante sera sรฉchรฉe ร lโair libre et de nouveau sera rรฉ-extraites.
MST Chimiomรฉtrie et analyse chimique application ร la gestion industrielle de la qualitรฉ
๏ง Rรฉ-extraction des รฉchantillons avec de lโรฉthanol
Aprรจs dรฉlipidation de lโรฉchantillon, il est rรฉ-extrait par lโรฉthanol selon les รฉtapes suivantes
๏ง Ajouter le volume dรฉsirรฉ de lโรฉthanol sur la matiรจre vรฉgรฉtale rรฉcupรฉrรฉe de la phase de dรฉlipidation, bouchรฉ et dans le bain ร ultrasons ร une frรฉquence de 35kHz, une puissance de 20 w et une tempรฉrature de 20 Cยฐ.
๏ง Aprรจs avoir รฉtรฉ extrait, le mรฉlange est filtrรฉ ร travers un papier Whatman.
๏ง La matiรจre de plante est sรฉchรฉe ร lโรฉtuve ร 40ยฐC et pesรฉe.
๏ง Le mรฉlange extrait est รฉvaporรฉe dans un rotavapeur ร 40ยฐC pour รฉliminer le solvant et rรฉcupรฉrer lโextrait sec.
๏ง Lโextrait sec rรฉcupรฉrรฉ est pesรฉ pour le calcul du rendement.
Figure 14 filtration du mรฉlange รฉthanolique Figure 15 Mรฉlange matiรจre vรฉgรฉtale/รฉthanol
๏ง Dรฉtermination du rendement en extrait
Le rendement en extrait est exprimรฉ en g dโextrait pour 100g de matiรจre sรจche, comme suit
Avec
Rendement en extrait
(g) masse de lโextrait rรฉcupรฉrรฉ
(g) masse vรฉgรฉtale sรจche (g)
MST Chimiomรฉtrie et analyse chimique application ร la gestion industrielle de la qualitรฉ
Dosage des composรฉs phรฉnolique
En se basant sur la composition chimique de lavandula. stoechace.L on a choisis le taux des polyphรฉnols comme deuxiรจme rรฉponse.
Le dosage des polyphรฉnols des diffรฉrents extraits a รฉtรฉ effectuรฉ avec le rรฉactif de Folin-Ciocalteux (Akkol et al., 2008), le tube rรฉactionnel contient 100 de solution mรฉthanolique de lโextrait brut ร 10mg/ml,0.5 du rรฉactif de Folin-Ciocalteux, 1.5 ml de carbonate de sodium ร 20% et on complรจte ร 10ml avec de lโeau distillรฉ. Les tubes sont par suite agitรฉs et conserver durant 2 heures ร tempรฉrature ambiante. Lโabsorbance est mesurรฉe ร 765nm contre un blanc ร lโaide dโun spectrophotomรจtre type (Selecta, E.U).
Figure 16 Tubes rรฉactionnel aprรจs 2 heures Figure 17 spectrophotomรจtre type (Selecta, E.U).
La courbe dโรฉtalonnage dโAcide Galique est construite ร partir des tubes รฉtalon prรฉparรฉ ร lโaide dโune solution dโAcide Galique de 1mg/ml ร partir de laquelle on prรฉpare une solution fille de 0.1mg/ml et on y ajoute tout les rรฉactifs selon le mode opรฉratoire citรฉ prรฉalablement. Les contenus du mรฉlange sont regroupรฉs dans le tableau suivant
Etude dโoptimisation
La formalisation du problรจme permet de rassembler lโexpรฉrience accumulรฉe de maniรจre diffuse afin de la complรฉter et de la prรฉciser grรขce ร lโexpรฉrimentation. Plus cette รฉtape sera รฉtablie avec soin plus les plans dโexpรฉrience seront fructueux. Dans ce but nous allons dรฉfinir le problรจme, dรฉterminer les objectifs de lโรฉtude et faire ressortir les paramรจtres dโentrรฉes ainsi que les variables de sortie du systรจme รฉtudiรฉ.
Dรฉfinir le problรจme
Le problรจme ร lequel on fait face dans notre projet est lโoptimisation des rรฉsultats dโextraction obtenus par la mรฉthode de sonication. Ce travail vise de trouver un point optimum dโextraction par sonication de la lavande qui assurera un compromis entre les diffรฉrents facteurs agissant sur ce processus tout en maximisant les rรฉponses choisis.
Dรฉterminer les objectifs
De maniรจre gรฉnรฉrale les objectifs quโon a spรฉcifiรฉs pour cette รฉtude sont les suivants
โข ยซ Dรฉbroussailler ยป, cโest-ร -dire faire le tri parmi lโensemble des variables dโentrรฉe susceptibles dโinfluencer les variables de sortie pour avoir plus de prรฉcision sur le rรฉglage de ces variables influentes.
โข ยซ prรฉvoir ยป et estimer avec beaucoup de prรฉcision lโeffet de lโensemble des variables dโentrรฉs influentes, de faรงons ร pouvoir modรฉliser de maniรจre assez fiable, la valeur des variables de sortie.
MST Chimiomรฉtrie et analyse chimique application ร la gestion industrielle de la qualitรฉ
Dรฉfinir les sorties (les rรฉponses)
La rรฉponse Y (variable de sortie) correspond ร un paramรจtre de sortie du systรจme รฉtudiรฉ. Dans notre projet, on a choisi de travailler sur deux rรฉponse concernant lโextraction par sonication de la Lavande stoechade le rendement de lโextraction (Y1) et le taux des polyphรฉnols extraite (Y2) quโon devra maximiser (voir le tab1 p.10).
Dรฉfinir les entrรฉs (les facteurs)
Les Facteurs X reprรฉsentent des causes possibles de variation de la rรฉponse Y. Le choix des facteurs influenรงant nos rรฉponses se basera dโabord sur une phase de recensement faisant appel aux intervenants dans le processus dโextraction pour รฉtablir une liste des facteurs potentiels qui sera prรฉsentรฉe sous forme de diagramme dโIshikiwa
Figure 19 Diagramme dโIshikiwa
Choix dโune stratรฉgie
Aprรจs avoir cernรฉ la problรฉmatique on va discuter la stratรฉgie des surfaces de rรฉponses quโon a choisie. Aprรจs la dรฉtection des facteurs influents possibles, il faut adopter une procรฉdure pour distinguer et choisir ceux qui sont potentiellement influents sur les rรฉponses considรฉrรฉes. En gรฉnรฉral on procรจde ร un criblage en utilisant les plans de criblage.
Le criblage des facteurs consiste ร distinguer, parmi un ensemble de facteurs potentiellement influents, ceux qui le sont effectivement dans un domaine dโรฉtude fixรฉ. Parmi les plans dโexpรฉriences largement utilisรฉs pour le criblage des facteurs, on peut citer les plans de Plackett et Burman, Taguchiโฆ
Dans la prรฉsente รฉtude on sโest basรฉ sur les rรฉsultats obtenus par lโรฉtude intitulรฉe ยซ Optimisation dโextraction assistรฉe par ultrasons de T.hyemalis utilisant la mรฉthodologie de MST Chimiomรฉtrie et analyse chimique application ร la gestion industrielle de la qualitรฉ surface de rรฉponse ยป [20] pour dรฉterminer les facteurs qui influencent le plus le rendement en extrait et le taux des polyphรฉnols.
Les principaux facteurs qui influent sur l’efficacitรฉ d’extraction โselon cette รฉtude-, y compris le temps d’extraction (min, X1), le ratio solvant/ matiรจre vรฉgรฉtale (mL/g, X2) et la concentration d’รฉthanol (en%, X3), ont รฉtรฉ sรฉlectionnรฉs en tant que variables indรฉpendantes qui doivent รชtre optimisรฉs pour lโextraction.
Remarque
La tempรฉrature n’a pas รฉtรฉ considรฉrรฉe dans ce prรฉsent travail parce que l’รฉchantillon a รฉtรฉ maintenu ร la tempรฉrature ambiante, dโabord pour profiter de lโune des caractรฉristiques les plus importantes de la sonication qui permet de rรฉaliser une extraction ร tempรฉrature ambiante sans avoir besoin de dรฉpenser plus dโรฉnergie, ensuite pour รฉviter la dรฉgradation des composรฉs sensibles ร la tempรฉrature.
Afin de rรฉaliser lโรฉtude dโoptimisation, les expรฉriences ont รฉtรฉ rรฉalisรฉes selon le plan de surface de rรฉponse de type Box-Behnken.
Caractรฉristiques des facteurs
Nous avons retenu certains paramรจtres quantitatifs (tempรฉrature, frรฉquence et puissance) fixes et dโautres paramรจtres quantitatifs (la concentration d’รฉthanol, le temps d’extraction et le ratio solvant/ matiรจre vรฉgรฉtale) comme variable ร optimiser.
Caractรฉristiques du plan
Nous proposons pour cette รฉtude un modรจle de second degrรฉ. Notre choix sโest portรฉ sur un plan Box-Behnken. Ce plan nรฉcessite 13 essais pour 3 facteurs. Nous ajouterons 2 essais au centre pour รฉvaluer lโerreur expรฉrimentale et faire une analyse de la variance du modรจle postulรฉ a priori, ce qui porte le nombre des essais ร 15 essais. Les caractรฉristiques du plan sont regroupรฉes dans le tableau 6
Matrice dโexpรฉrience
La matrice dโexpรฉrience est reprรฉsentรฉe par le tableau 4
Plan dโexpรฉrimentation
Le tableau 5 reprรฉsente le plan des expรฉriences rรฉalisรฉes selon lโordre alรฉatoire recommandรฉ.
|
Table des matiรจres
INTRODUCTION
ETUDE BIBLIOGRAPHIQUE
I. Prรฉsentation de lโagence nationale des plantes mรฉdicinales et aromatiques (INPMA)
II. Les plantes aromatiques et mรฉdicinales
1. Gรฉnรฉralitรฉs
2. Aspect รฉconomique
3. Aspect environnementale .
III. Gรฉnรฉralitรฉ sur la plante รฉtudiรฉe (Lavandula Stoechas. L)
1. Systรฉmatique et รฉcologie de la lavande stoechade
2. Propriรฉtรฉs thรฉrapeutiques et pharmacologique de la lavande a toupet
3. Compositions chimique de lโextrait mรฉthanoรฏque de la lavande stoechad
IV. Extraction par les ultrasons
1. Principe de lโultrason
2. Les paramรจtres influents
V. Mรฉthodologie des plans dโexpรฉriences
1. Principe
2. Vocabulaire de base des plans dโexpรฉriences
3. Modรฉlisation par rรฉgression linรฉaire multiples
4. Conditions dโapplication des plans dโexpรฉriences
5. Validation du modรจle postulรฉ
6. Plan de surface de rรฉponse de type Box-Behnken
PARTIE MATERIELS ET METHODES
I. Matรฉriel vรฉgรฉtal utilisรฉ
II. Protocole expรฉrimentales
1. Lโextraction assistรฉe par ultrasons
2. Dosage des composรฉs phรฉnolique
II. Etude dโoptimisation
1. Dรฉfinir le problรจme
2. Dรฉterminer les objectifs
3 .Dรฉfinir les sorties (les rรฉponses) .
4. Dรฉfinir les entres (les facteurs)
5. Choix dโune stratรฉgie
PARTIE RESULTATS ET DISCUSSION
I. Rรฉsultat de lโรฉtude dโoptimisation
II. Analyse des rรฉsultats de lโรฉtude dโoptimisation
1. Analyse des rรฉponses
2. Analyse de la variance et manque dโajustement
3. Analyse des rรฉsidus
4. Estimation et statistiques des coefficients
5. Optimisation des rรฉponses
6. Modรจle mathรฉmatiques
7. Vรฉrification du modรจle par des points tests
8. Conclusion de lโรฉtude dโoptimisation
CONCLUSION GENERALE
Rรฉfรฉrences bibliographiques
Tรฉlรฉcharger le rapport complet