ETUDE DU PARASITE ANOPLOCEPHALA PERFOLIATA

ETUDE DU PARASITE : ANOPLOCEPHALA PERFOLIATA

Méthodes diagnostiques

Diagnostic ante-mortem

Diagnostic épidémiologique et clinique

Aucun signe clinique ne permet de diagnostiquer le téniasis chez le cheval. La prévalence étant élevée, on peut considérer que tout cheval ayant accès au pâturage présente un risque d’infestation non négligeable.

Diagnostic coproscopique

En routine, actuellement seule la coproscopie permet de mettre en évidence la présence de parasites adultes en cherchant leur production (les œufs). C’est une méthode très spécifique puisque la morphologie des œufs d’Anoplocephala perfoliata est caractéristique. Toutefois la découverte des œufs est aléatoire à cause d’une libération discontinue de ceux-ci. La sensibilité de toutes les techniques coproscopiques confondues ne dépasse pas 61% (Proudman et al. 1996).

Diagnostic sérologique

Des techniques sérologiques de détection d’Anoplocephala perfoliata mises au point à partir des antigènes excrétés / sécrétés (Proudman et al. 1996), ou à partir du scolex (Höglund et al. 1995) ont été développées mais ne donnent pas des valeurs de sensibilité beaucoup plus élevées que les méthodes de coproscopie classiques.
Ces méthodes de diagnostic sérologique sont développées pour de nombreux cestodes aussi bien chez l’Homme que chez l’animal. Le test ELISA a été mis en œuvre pour le diagnostic sérologique de l’infestation par Taenia ovis, Taenia hydatigena, Taenia pisiformis, Taenia solium, Echinococcus granulosus. Toutes ces méthodes permettent de déceler la présence d’anticorps sériques dirigés contre le parasite. Ces études sur la mise au point de test ELISA ont utilisé des antigènes de cestodes de diverses origines : antigènes somatiques ou antigènes excrétés / sécrétés (E / S). Gasser et al. (1988) ont comparé les performances des tests ELISA avec antigènes excrétés / sécrétés et ceux issus du proto-scolex. Ils ont trouvé que les antigènes E/S donnaient une meilleur sensibilité. Le défaut de détection de la réponse immunitaire est due à un problème de présentation de l’antigène somatique au système immunitaire de l’hôte. Bien que les protéines E/S soient présentes dans les antigènes somatiques car sécrétées par le soma, celles-ci peuvent être masquées par d’autres protéines présentant une forte affinité ou présentes en plus grand nombre. La production des antigènes E/S pose aussi un problème. En effet les parasites sont de petite taille ce qui conduit à une faible production d’antigènes dans la lumière de l’intestin. De plus des antigènes non souhaités sont produits : il s’agit des antigènes libérés par les segments gravides et les antigènes des parasites morts.

Diagnostic par détection de copro-antigènes

Des méthodes de diagnostic basées sur la mise en évidence de copro-antigènes existent pour d’autres espèces que le cheval. La majorité d’entre elles sont des méthodes ELISA basées sur la production de sérums hyper immuns de lapins obtenus à partir d’antigènes somatiques (Allan et al. 1990 / Allan et al. 1992) ou à partir d’antigènes excrétés / sécrétés (Deplazes et al. 1990). Divers cestodes sont testés ; les tests montrent des sensibilités élevées : par exemple pour Echinococcus granulosus, la sensibilité est de 87,5% (Allan et al. 1993). Aucun test basé sur la détection des copro-antigènes n’existe chez les herbivores pour le diagnostic d’infestation par les Anoplocephalidés. Cette méthode est particulièrement intéressante car elle met en évidence des témoins d’une infestation : les antigènes parasitaires. Alors que le diagnostic sérologique détecte une infestation par des témoins indirects : les anticorps.
Diagnostic post-mortem
Sur animal mort, l’autopsie permet de mettre en évidence les parasites fixés sur la paroi intestinale et les lésions associées.

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Table des matières

PREAMBULE
INTRODUCTION BIBLIOGRAPHIQUE
I. ETUDE DU PARASITE : ANOPLOCEPHALA PERFOLIATA
1.1. Taxinomi
1.2. Morphologie
1.2.1.Morphologie du parasite adulte
1.2.2. Morphologie de l’œuf
1.3. Cycle biologique
1.4. Epidémiologie
1.4.1. Epidémiologie descriptive
1.4.1.1. Prévalence
1.4.1.2. Variations de prévalence
1.4.1.2.1. Variations régionales
1.4.1.2.2. Variations saisonnières
1.4.1.2.3. Variations avec les caractéristiques individuelle
1.4.1.2.4. Variations avec le mode de vie et les conditions de logement
1.4.2. Epidémiologie analytique
1.4.2.1. Sources de parasites
1.4.2.2. Résistance du parasite
1.4.2.3. Modes d’infestation
1.5.Pathologie
1.5.1. Symptômes
1.5.2. Lésions
1.4.3. Pouvoir pathogène
II. METHODES DIAGNOSTIQUES
2.1. Diagnostic ante-mortem
2.1.1. Diagnostic épidémiologique et clinique
2.1.2. Diagnostic coproscopique
2.1.3. Diagnostic sérologique
2.1.4. Diagnostic par détection des copro-antigènes
2.2. Diagnostic post-mortem
MATERIEL ET METHODES
OBJECTIFS
PREMIERE PARTIE : ECHANTILLONNAGE DES FECES
1.1. Nature de l’échantillon
1.2. Recrutement des échantillons
1.3. Récolte des échantillon
1.4. Conservation, transport
1.5. Informations complémentaires
DEUXIEME PARTIE : REALISATION DE COPROSCOPIES
I. PRINCIPE DE L’EXAMEN COPROSCOPIQUE
1.1. Principe de la méthode de flottation
1.2. Principe de la méthode de Proudman
II. METHODE DE FLOTTATION QUALITATIVE ET QUANTITATIVE
2.1. Matériel
2.2. Procédure
III. METHODE DE CENTRIFUGATION, FLOTTATION
3.1. Matériel
3.2. Procédure
TROISIEME PARTIE : MISE AU POINT D’UN TEST ELISA POUR LA DETECTION DE COPRO-ANTIGENES
I. PRINCIPE DU TEST ELISA
II. PRODUCTION DES ANTIGENES PARASITAIRES
2.1. Production d’antigènes à partir des parasites entiers
2.2. Production d’antigènes excrétés / sécrétés
2.2.1. Premier essai de production d’antigènes excrétés / sécrétés
2.2.2. Deuxième essai de production d’antigènes excrétés / sécrétés
2.3. Dosage des solutions antigéniques
III. PRODUCTION DE SERUMS
3.1. Immunisation des souris
3.2. Evaluation de l’immunisation
IV. UTILISATION DES TECHNIQUES AVEC DES FECES DE CHEVAL
4.1. Traitement des échantillons de fèces
4.1.1. Premier essai de traitement des fèces
4.1.2. Deuxième essai de traitement des fèces
4.2. Dosage ELISA des antigènes contenus dans le surnageant
4.3. Modification de différents paramètres
4.3.1 Action sur la température
4.3.2 Action sur les supports de plaque
4.3.3 Changement du type de révélation
RESULTATS
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE