Etude de l’effet de l’extrait RH1112 sur la phase vasculaire 

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Criblage phytochimique

Ce test a été effectué pour identifier les familles chimiques présentes dans l’extrait RH1112. Il s’agit d’une analyse qualitative basée sur des réactions de coloration et/ou de précipitation entre des réactifs spécifiques et les familles chimiques correspondantes (FONG H. H. S. et coll., 1977) (Tableau I).
Les signes suivants ont été utilisés pour quantifier la proportion relative des différentes familles chimiques présentes dans l’extrait RH1112:
+ : Présence de la famille chimique en faible teneur.
++ : Présence de la famille chimique en teneur moyenne.
+++ : Présence de la famille chimique en forte teneur.

PARTIE PHARMACOLOGIQUE

L’activité de l’extrait RH1112 sur la phase vasculaire de l’inflammation a été étudiée par son effet sur la perméabilité vasculaire. Tandis que son activité sur la phase tissulaire a été étudiée par son effet sur la formation de granulome (ABENA A. A. et coll., 1997 ; KOU J. et coll., 2006).

Animaux d’expérience

Des souris de race SWISS des deux sexes, âgées de 6 à 8 semaines, pesant entre 25 et 30 grammes ont été utilisées. Elles ont été élevées à l’animalerie du LPGPC à la Faculté des Sciences de l’Université d’Antananarivo, elles ont été soumises à une alternance de lumière et d’obscurité de 12h/12h, à la température ambiante. Elles ont été nourries avec de la provende LFL 14/20, et ont eu accès libre à l’eau. Elles ont été mises à jeun pendant 16h avant les manipulations avec un accès libre à l’eau (OTARI K. V. et coll., 2010).

Etude de l’effet de l’extrait RH1112 sur la phase vasculaire

L’activité de RH1112 sur la phase vasculaire a été étudiée sur la vasodilatation provoquée par l’acide acétique. Pour évaluer la vasodilatation, une solution de bleu d’Evans 1 % préparée dans une solution de NaCl 0,9 % a été injectée par voie intraveineuse (KOU J. et coll., 2006).
Trois lots de 3 souris mises à jeun pendant 16 h ont été utilisées : 1 lot témoin et 2 lots traités avec l’extrait RH1112. Les animaux du lot témoin ont reçus 10 ml/kg d’eau distillée par voie orale, tandis que ceux des 2 autres lots ont reçus par la même voie, l’extrait aux doses de 400 et 800 mg/kg dans un volume de 10 ml/kg (KOU J. et coll., 2006 ; DIELH H. K., 2010).
Trente minutes après, 10 ml/kg de la solution de bleu d’Evans ont été injectées au niveau de la veine caudale des souris (Figure 1). Quinze minutes après, 10 ml/kg d’acide acétique à 0,7 % ont été injectés par voie intra péritonéale (Figure 2). Après 15 minutes, les animaux ont été sacrifiés par dislocation cervicale, puis la cavité péritonéale a été ouverte et lavée avec 2 ml de solution de NaCl 0,9 %. La solution de lavage a été récoltée et centrifugée à 1500 tours/min pendant 10 minutes à l’aide d’une centrifugeuse (Figure 3). Le surnageant a été récupéré et sa densité optique a été mesurée à l’aide d’un colorimètre PIERRON ®, à la longueur d’onde de 520 nm contre une solution de NaCl 0,9 % qui a été utilisée comme blanc (KOU J. et coll., 2006). Les résultats ont été exprimés en inhibition de la perméabilité vasculaire calculée selon la formule.

Etude de l’effet de l’extrait RH1112 sur la phase tissulaire

La phase tissulaire de l’inflammation est caractérisée par la formation d’un granulome. L’activité de RH1112 sur cette phase a été étudiée par son effet sur la formation de granulome expérimental provoqué par l’insertion d’un corps étranger sous la peau de la souris (ABENA A. A. et coll., 1997). Une solution de carragénine 1 % a été préparée dans une solution de NaCl 0,9 %. Les souris ont été anesthésiées par inhalation d’éther diéthylique, puis la région scapulaire a été rasée, et 2 incisions d’environ 0,5 cm ont été effectuées au niveau de la région scapulaire, puis une boule de coton de 10 mg imbibée de carragénine 1% a été insérée sous la peau de l’animal au niveau de chaque incision (Figure 4) (ABENA A. A. et coll., 1997).

Effet de RH1112 sur la phase vasculaire

L’administration de l’extrait RH1122 par voie orale, 45 minutes avant l’injection de l’acide acétique, diminue la densité optique du liquide intra péritonéal (Figure 6). Chez le lot témoin, la densité optique du bleu d’Evans dans le liquide intra péritonéal est égale à 2,309 ± 0,003, contre 1,523 ± 0,001 et 0,755 ± 0,015 chez les animaux traités avec l’extrait aux doses respectives de 400 et 800 mg/kg, ce qui correspondent à une inhibition de la perméabilité vasculaire de 34,04 ± 0,001 et 67,30 ± 0,015 % respectivement chez les animaux traités avec RH1112 aux doses de 400 mg/kg et 800 mg/kg (P ˂ 0,05) (Figure 6).

Effet de RH1112 sur la phase tissulaire

L’administration de l’extrait RH1112 par voie orale, une fois par jour, pendant 7 jours, diminue le poids des boules de coton chez les animaux traités avec l’extrait par rapport aux animaux du lot témoin. Le poids des boules de coton chez les animaux du lot témoin est égal à 53,85 ± 0,62 mg , contre 33,32 ± 0,3 et 19,95 ± 0,38 mg respectivement chez les animaux traités avec l’extrait RH1112 aux doses de 400 et 800 mg/kg, ce qui correspondent à une inhibition de 38,13 ± 0,30 % et 62,95 ± 0,38 % respectivement (P < 0,05) (Figure 7).
Figure 7. Poids des boules de coton imbibées de carragénine, insérées sous la peau des souris, pendent 7 jours, chez le lot témoin ∎ et chez les lots traités avec l’extrait RH1112 administré par voie orale, une fois par jour, pendant 7 jours, aux doses de 400 mg/kg ∎ et 800 mg/kg∎ ( ̅ ± e. s. m; n = 3; P < 0,05).

Table des matières

TABLE DES MATIERES
LISTE DES FIGURES
LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES ABREVIATIONS ET DES SIGLES
I. INTRODUCTION 
II. MATERIELS ET METHODES 
A. PARTIE CHIMIQUE
1. Extraction
2. Criblage phytochimique
B. PARTIE PHARMACOLOGIQUE
1. Animaux d’expérience
2. Etude de l’effet de l’extrait RH1112 sur la phase vasculaire
3. Etude de l’effet de l’extrait RH1112 sur la phase tissulaire
C. EXPRESSION ET ANALYSE DES RESULTATS
III. RESULTATS 
A. PARTIE CHIMIQUE
1. Rendement de l’extraction
2. Résultats du criblage phytochimique
B. PARTIE PHARMACOLOGIQUE
1. Effet de RH1112 sur la phase vasculaire
2. Effet de RH1112 sur la phase tissulaire
IV. DISCUSSION 
V. CONCLUSION 
BIBLIOGRAPHIE

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