DOSAGE DE LA CHLORPROMAZINE PAR SPECTROMETRE JASCO V 530
Activitรฉs du laboratoire de pharmacotoxicologie
Le Laboratoire de pharmacotoxicologie effectue principalement de la recherche, de l’identification et du dosage des mรฉdicaments. Il a deux domaines principaux dโactivitรฉ :
Lโactivitรฉ pharmacologique Le suivi thรฉrapeutique pharmacologique consiste ร adapter individuellement la posologie de certains mรฉdicaments dans des situations mรฉdicales ร risque ร partir de la mesure de paramรจtres d’exposition du patient au mรฉdicament. Ces activitรฉs sont assurรฉes pour les patients hospitalisรฉs au CHU de Fรจs ainsi que pour des hรดpitaux, cliniques et laboratoires de la rรฉgion.
L’activitรฉ toxicologique Elle vise ร diagnostiquer les principales causes d’intoxication mรฉdicamenteuses ou autres tel que l’alcool, les produits stupรฉfiants, certains pesticides ou herbicides… Des activitรฉs de recherche sont associรฉes ร ces activitรฉs de laboratoire:
Lโactivitรฉ de recherche et dรฉveloppement Les praticiens du laboratoire dรฉveloppent de nouvelles mรฉthodes d’analyses permettant de suivre le progrรจs thรฉrapeutique (nouveaux mรฉdicaments), de mesurer des concentrations de plus en plus faibles de toxiques ou mรฉdicaments avec des mรฉthodes de plus en plus spรฉcifiques.
Protocole de validation dโune mรฉthode analytique
Dรฉfinitionย et objectif de la validation La validation dโune mรฉthode est la procรฉdure par laquelle on dรฉmontre, preuves expรฉrimentales ร lโappui, que les performances de la mรฉthode permettent de rรฉpondre aux exigences de lโusage auquel elle est destinรฉe. Elle a pour principal objectif de s’assurer qu’une mรฉthode analytique donnรฉe donnera des rรฉsultats suffisamment fiables et reproductibles.
Critรจres de validation La validation dโune mรฉthode en bio-analyse comprend une succession de procรฉdures qui a pour objectif de dรฉmonter que la mรฉthode utilisรฉ permet de quantifier un analyste dans une matrice particuliรจre pour une application prรฉcise.
Linรฉaritรฉ: La linรฉaritรฉ dโune mรฉthode dโanalyse est sa capacitรฉ ร lโintรฉrieur dโun certain intervalle, de donner des rรฉsultats qui sont directement proportionnels ร la concentration (quantitรฉ) de la substance analysรฉe dans un รฉchantillon. La linรฉaritรฉ dโune courbe dโรฉtalonnage est vรฉrifiรฉe par le calcule du coefficient de dรฉtermination ยซ R2 ยป. Une valeur supรฉrieure ร 0,995 de ce coefficient permet dโaffirmer avec quasi certitude que la droite dโรฉtalonnage et linรฉaire. Lโรฉquation de la droite dโรฉtalonnage est
Fidรฉlitรฉ: La fidรฉlitรฉ ร un niveau donnรฉ correspond ร lโรฉtroitesse de lโaccord entre les valeurs obtenues par des mesurages rรฉpรฉtรฉs de mรชme objet ou dโobjets similaires dans des conditions spรฉcifiรฉes. Selon les conditions dโexรฉcution de lโessai, cette caractรฉristique sโexprime sous forme de fidรฉlitรฉ intermรฉdiaire, de rรฉpรฉtabilitรฉ ou de reproductibilitรฉ pour une mรฉthode.
Rรฉpรฉtabilitรฉ
La Rรฉpรฉtabilitรฉ ร un niveau donnรฉ correspond ร lโรฉtroitesse de lโaccord entre les rรฉsultats individuels successifs obtenus sur le mรชme รฉchantillon soumis ร lโessai dans le mรชme laboratoire, exรฉcutรฉ par le mรชme analyste, avec le mรชme appareil, pendant le mรชme jour. Tableau 2 : les diffรฉrents termes calculรฉs pour la rรฉpรฉtabilitรฉ
Test des valeurs aberrantes Une fois quโon a dรฉterminรฉ la nature de la distribution de la population รฉtudiรฉ on passe au test des valeurs aberrantes. Ici on parle du test de grubbs. Dans ce test, on va dรฉterminer les valeurs max et min des moyenne et de la totalitรฉ des mesures, puis on calcule les deux rรฉsidus Ga et Gb et on compare ces derniers avec les deux rรฉsidus critiques retirรฉs de la table de grubbs. Les rรฉsultats obtenus sont reprรฉsentรฉs dans les tableaux ci-dessous :
CONCLUSION
Mon stage effectuรฉ au sein du laboratoire central dโanalyses mรฉdicales de CHU. Durant ce stage jโai eu lโoccasion dโapprofondir mes connaissances scientifiques et participer ร lโoptimisation et la validation de la mรฉthode de dosage de la chlorpromazine par spectromรจtre UV-visible Aprรจs avoir rรฉalisรฉ la validation analytique de la mรฉthode dโanalyse de la chlorpromazine Par spectromรจtre UV- visible, nous avons pu dรฉduire les conclusions suivantes :
La justesse de la mรฉthode est vรฉrifiรฉe.
La fidรฉlitรฉ de la mรฉthode est prouvรฉe.
La droite dโรฉtalonnage est linรฉaire.
Les rรฉsultats obtenus nous permet de conclure que la mรฉthode apte pour lโanalyse des mรฉdicaments. La mise en place de cette mรฉthode de dosage de la chlorpromazine, offre au mรฉdecin des rรฉsultats rapides, fiables, et prรฉcieux pour le suivi de lโรฉvolution ou lโรฉvaluation du traitement instaurรฉ pour le patient, en diminuant la gravitรฉ des effets indรฉsirables, et aussi pour une meilleure adaptation de la dose administrรฉe. Au cours du dosage de la chlorpromazine par spectromรจtre, nous avons constatรฉ une variation permanente de lโabsorbance, alors pour rรฉsoudre ce problรจme, il est recommandรฉ dโajouter un stabilisateur aux solutions รฉtalons.
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Table des matiรจres
INTRODUCTION
CHAPITRE 1 : PRESENTATION DU LABORATOIRE ET DESCRIPTION DU SUJET
I. PRESENTATION DU LABORATOIRE CENTRAL DโANALYSES MEDICALES (LCAM)
1. Activitรฉs du laboratoire de pharmacotoxicologie
2. Les diffรฉrentes mรฉthodes dโanalyses mรฉdicamenteuses du LCAM
II. DESCRIPTION DU SUJET
1. Introduction
2. Les phรฉnothiazines
a. Dรฉfinition
b. Utilisation
c. Structure chimique
3. La chlorpromazine (largagtil)
a. Dรฉfinition
b. Indications thรฉrapeutiques
c. Effets secondaires
4. Protocole de validation dโune mรฉthode analytique
a. Dรฉfinition et objectif de la validation
b. Critรจres de validation
๏๏ Linรฉaritรฉ
๏๏ Fidรฉlitรฉ
๏๏ Justesse
5. Notions de statistique
6. La Spectrophotomรฉtrie
a. Dรฉfinition
b. Applications de la spectroscopie UV-visible
c. Loi de Beer-Lambert
CHAPITRE 2 – PARTIE PRATIQUE : MATERIELS ET METHODES
I. INTRODUCTION
II. DOSAGE DE LA CHLORPROMAZINE PAR SPECTROMETRE JASCO V 530
1. Principe
2. Appareillage
3. Matรฉriels
4. Rรฉactifs
III. PREPARATION DES SOLUTIONS
1. Prรฉparation de 20ml de solution de quinydrone de
2. Prรฉparation dโune solution dโhydroxyde de sodium ร 40%
3. Prรฉparation de lโรฉtalon largagtil 5mg/ml
4. Prรฉparation de la gamme dโรฉtalonnage
IV. RESULTATS ET DISCUSSIONS
1. Vรฉrification de linรฉaritรฉ
2. Vรฉrification de la fidรฉlitรฉ
a. Test de normalitรฉ
b. Test des valeurs aberrantes
c. Test dโhomogรฉnรฉitรฉ des variances
d. Test dโANOVA-1
e. Fidรฉlitรฉ
3. Vรฉrification de la justesse
CONCLUSION
EEFERANCES ET WEBOGRAPHIE
ANNEXES
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