Calibration de la centrifugeuse à microhématocrite

Calibration de la centrifugeuse à microhématocrite

Résultats statistiques
Comparaison des lecteurs

Les méthodes de mesures utilisées sont élémentaires. Il s’agit de l’abaque de lecture spécifique pour microhématocrite, d’une réglette et de papier millimétré.
Des différences sensibles de mesures sont notables entre les lecteurs. Pour que ces différences de lectures soient significatives, il faut, d’après les tests d’égalité des espérances : pour des observations de paires (obs . pairées) que p soit inférieur à 0,05. Les tests statistiques nous  permettent d’apprécier la reproductibilité des lectures. Les résultats sont présentés dans les tableaux 20,21 et 22 en annexe.

Utilisation du papier millimétré

Il n’y a pas eu de différence significative (test de Student en séries appariées, P>00,5) entre les lecteurs, en utilisant le papier millimétré, dans la mesure :
– de la hauteur du culot érythrocytaire du tube à Ht 1
– de la hauteur du plasma du tube à Ht 2
– de la hauteur au sommet du BC du tube à Ht 1
Par contre, il existe une différence significative entre les lecteurs dans la mesure :
– de la hauteur du plasma du tube à Ht 1 (P=0,03) avec une différence moyenne de 0,16mm (mini : -0,5mm ; maxi : +1,6mm) et avec 90% des différences comprises entre -0,5 et +1.
– de la hauteur du culot érythrocytaire sur le tube à Ht 2 (P=0,01) avec une différence moyenne de 0,1mm (mini : -1mm ; maxi : +0,5mm) et avec 90% des différences comprises entre -0,7 et +0,3.
– de la hauteur au sommet du BC sur le tube à Ht 2 (P=0,04) avec une différence moyenne de 0,1mm (mini : -1.5mm ; maxi : +0,5mm) et avec 90% des différences comprises entre -0,8 et +0,5

Utilisation de la réglette et de l’abaque

Il n’y a pas eu de différence significative entre les lecteurs, sur les deux tubes à Ht, par ces méthodes (test de Student en séries appariées P>0,05) dans la mesure :
– de la hauteur du culot érythrocytaire
– de la hauteur du plasma
– de la hauteur au sommet du BC

Comparaison des prélèvements en duplicate

Il s’agit de comparer les résultats obtenus entre les deux tubes à Ht réalisés pour chaque prélèvement. Les résultats sont présentés dans les tableaux 20, 21 et 22 en annexe.
– Papier millimétré:
Il n’y a pas eu de différence significative (test de Student en séries appariées, P>0,05) entre les deux tubes à Ht pour la mesure du microhématocrite et du leucocrite.
– Réglette:
Il n’y a pas eu de différence significative (test de Student en séries appariées, P>0,05) entre les deux tubes à Ht pour la mesure du microhématocrite.
Par contre, il existe une différence significative entre les deux tubes à Ht pour la mesure du leucocrite (P=0,02) avec une différence moyenne entre les leucocrites de 0,0006 (mini : – 0.006; maxi : +0,007) et avec 90% des différences comprises entre -0,004 et +0,004.
– Abaque:
Il n’y a pas eu de différence significative (test de Student en séries appariées, P>0,05) entre les deux tubes à Ht pour la mesure du leucocrite.
Par contre, il existe une différence significative entre les deux tubes à Ht pour la mesure du microhématocrite (P=0,03) avec une différence moyenne entre les microhématocrites de 0,001 (mini : -0,015 ; maxi : +0,01) et avec 90% des différences comprises entre -0,005 et +0,0075.
Il est important de noter que face à un manque de précision de nos outils de mesure, les différences de mesures entre les lecteurs et entre les deux tubes à Ht, bien que statistiquement significatives, restent acceptables.

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Table des matières

Introduction
PREMIERE PARTIE : PRESENTATION ET INTERET DE L’ETUDE
I. Microhématocrite et buffy coat
I.1. Historique
I.2. Définitions
II. Intérêt de la mesure de l’épaisseur du buffy coat
DEUXIEME PARTIE : ETUDE EXPERIMENTALE
I. Matériel et méthodes
I.1. Contrôle qualité
I.1.1. Contrôle qualité quotidien de l’automate Sysmex XT-2000iV
I.1.2. Vérification de la calibration de la centrifugeuse à microhématocrite
I.2. Etude comparative
I.2.1. Critères d’inclusion
I.2.2. Analyse des spécimens
I.2.2.1. Passage sur l’analyseur d’hématologie Sysmex XT-2000iV
I.2.2.2. Réalisation du microhématocrite
I.2.2.3. Réalisation du frottis sanguin
I.2.2.4. Lecture du microhématocrite et mesure du buffy coat
I.2.2.5. Coloration et lecture du frottis sanguin
I.2.3. Enregistrement des données
I.2.4. Analyses statistiques
II. Résultats
II.1. Calibration de la centrifugeuse à microhématocrite
II.2. Reproductibilité des numérations effectuées par l’automate Sysmex XT-2000iV
II.3. Les plaquettes
II.3.1. Numérations plaquettaires
II.3.2.Analyse des frottis sanguins
II.4. Les microhématocrites
II.4.1. Lectures des microhématocrites à l’aide de l’abaque spécifique
II.4.2. Microhématocrites calculés à partir des mesures effectuées avec le papier millimétré et la réglette
II.5. Les leucocytes
II.5.1. Numérations leucocytaires
II.5.2. Analyse des frottis sanguins
II.5.3. Leucocrites calculés à partir des lectures effectuées avec l’abaque spécifique
II.5.4. Leucocrites calculés à partir des mesures effectuées avec le papier millimétré et la réglette
II.6. Résultats statistiques
II.6.1 Comparaison des lecteurs
II.6.1.1 Utilisation du papier millimétré
II.6.1.2 Utilisation de la réglette et de l’abaque
II.6.2 Comparaison des prélèvements en duplicata
II.6.2.1 Papier millimétré
II.6.2.2 Réglette
II.6.2.3 Abaque
II.6.3 Comparaison des méthodes de mesure de l’épaisseur du buffy coat
III. Discussion
III.1. Méthode de microhématocrite
III.1.1. Excès d’anticoagulant
III.1.2.Homogénéisation du sang
III.1.3. Temps de centrifugation
III.1.4. Interfaces
III.1.5. Plaquettes
III.2. Lecture
III.2.1. Contraste
III.2.2. Précision
III.2.3. Agrégats
III.3. Intérêt de la méthode semi-quantitative et application en cabinet vétérinaire
III.3.1. Intérêt de la méthode semi-quantitative dans le diagnostic rapide des leucocytoses marquées
III.3.2. Intérêt de la méthode semi-quantitative dans le diagnostic rapide des leucopénies
III.3.3. Application en cabinet vétérinaire
Conclusion
Annexes
Références bibliographiques

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