Soutenance mémoire
Echantillonnage du matériel biologique
Engins et techniques de pêche utilisés
Dans les îles du Saloum, l’essentiel de la pêche est artisanale. Les engins utilisés sont les sennes de plage, les filets maillants dérivants de surface (les félé félé à poissons) et l’épervier. Dans le cadre de ce travail, seules les sennes de plage ont été utilisées.
Les sennes de plage
Elles sont considérablement évoluées avec l’apparition des fibres synthétiques : dimensions largement augmentées, longévité accrue, permettant le passage d’un régime d’exploitation saisonnier à un régime plus continu. Les sennes nécessitent généralement un espace particulier pour être halées (bancs de sable notamment). Elles ont une puissance de pêche élevée. Les captures sont généralement multispécifiques, bien qu’il existe un type spécialisé pour la pêche des Mugilidae, la senne de plage opane (mbal law opane). Elle a une longueur de 400 à 500 m et la hauteur du filet peut atteindre 7,5 m. Le maillage, homogène, est de 28 mm. L’engin est presque entièrement construit avec le même type de fil (2220 m/kg) sauf quelques fois dans les zones où il est très vulnérable. Il est utilisé le jour comme la nuit, quelque soit l’état de la marée. Il est plus efficace en période de reflux. Les zones privilégiées sont les bolong, les fonds côtiers, les bras du fleuve et les passes (BOUSSO, 1996).
Achat et conditionnement des poissons
Les poissons achetés aux débarquements sont maintenus frais avec de la glace dans des thermostats. Ils sont ensuite acheminés au laboratoire de parasitologie du département de Biologie Animale de la faculté des Sciences et Techniques de l’université Cheikh Anta DIOP de Dakar.
Identification et dissection des poissons
Caractéristiques des Mugilidae
Les Mugilidae sont des poissons côtiers des mers tropicales et tempérées. Les milieux saumâtres estuariens et lagunaires constituent leur domaine de prédilection. Très euryhalins, ils colonisent les milieux hypersalés et remontent dans les eaux douces du cours inférieur des fleuves. Suivant les espèces, la reproduction a lieu en mer (le plus souvent) ou da ns des estuaires et des lagunes. Ces mulets se nourrissent essentiellement de végétaux et de détritus qu’ils broutent ou sucent sur le fond.
Ce sont des poissons allongés dépourvus de ligne latérale, au corps recouvert d’écailles petites ou grandes. La tête est large et aplatie, le museau obtus et court, la bouche petite, terminale et infère. Les deux nageoires dorsales sont courtes et bien séparées l’une de l’autre ; la première se compose de 4 épines minces. Les pectorales sont situées assez haut sur les flancs et les pelviennes sont en position abdominale. Des écailles modifiées (processus axillaire) peuvent être présentes au dessus des nageoires pectorales et pelviennes. Les Mugilidae sont généralement des poissons aux flancs argentés, avec parfois des reflets dorés, et une partie dorsale plus sombre. Les différences morphologiques et anatomiques qui permettent de distinguer les espèces sont peu nombreuses et souvent difficilement perceptibles; d’où une certaine confusion dans la taxonomie de ce groupe tant au niveau des genres qu’au niveau des espèces. Les spécimens collectés ont été identifiés grâce aux clés de DIOUF (1991) et de LEVEQUE et al. (1992). Ils appartiennent à la famille des Mugilidae. Nous les avons répartis dans deux genres et six espèces : Mugil bananensis , Mugil cephalus , Mugil curema , Liza dumerili , Liza falcipinnis. et Liza grandisquamis .
Dissection des poissons
Des dissections étalées dans le temps ont été effectuées au laboratoire après chaque sortie. Pour chaque individu, le poids total et le poids éviscéré sont déterminés à l’aide d’une balance de précision. Les viscères sont vidés dans un bac à dissection et le sexe déterminé. Les organes notamment le foie, les gonades (testicules ou ovaires), le rein sont prélevés et mis dans des boîtes de Pétri. L’estomac, les cæcums pyloriques et l’intestin ont été séparés et ouverts chacun longitudinalement dans des boîtes de Pétri contenant une solution de NaCl à 9‰. Avant d’être ouvert, l’intestin est déroulé dans un bac à dissection et sectionné en trois portions : antérieure, moyenne et postérieure.
Recherche et étude morphologique des Nématodes
Recherche des nématodes
Les différents organes (œsophage, estomac, caeca, intestin et leurs contenus, cavité générale, rein, foie, gonades) ont été examinés à la loupe binoculaire. Chaque organe a été ouvert et munitieusement observé à la loupe. Des photos in situ d’organes parasités y ont également été réalisées Les nématodes trouvés ont été mis dans des salières contenant de l’eau. Avec une plume ou des pinceaux, les adultes ont été nettoyés, les stades larvaires ont été enlevés de la capsule où ils étaient logés puis nettoyés. Tous les nématodes, adultes et larvaires, ont été conservés dans des tubes étiquetés contenant de l’éthanol 70°c. Sur chaque étiquette, le nom de l’hôte, la date, le lieu de récolte et l’organe dans lequel le parasite a été trouvé sont marqués. Le nombre de parasites par organe pour chaque espèce et leur site ont été mentionnés dans un cahier.
Etude morphologique des Nématodes
Les vers, montés entre lames et lamelles dans une goutte de lactophénol qui permet leur éclaircissement, sont observés au microscope photonique de type Nikon et les dessins ont été réalisés à la chambre claire.
Etude histologique
Des prélèvements ont été effectués sur les différents organes parasités en vue d’une étude histologique. Le matériel a été inclus dans de la paraffine, coupé et coloré suivant les procédés classiques après fixation :
➤ 1er bain d’alcool à 95° de 8 h à 12 h ;
➤ 2ème bain d’alcool à 95° de 12 h à 15 h ;
➤ 3ème bain d’alcool à 95° à partir de 15 h. La préparation y a été maintenue jusqu’au lendemain à 8 h ;
➤ 1er bain de butanol de 8 h à 12 h ;
➤ 2ème bain de butanol de 12 h à 15 h ;
➤ 3ème bain de butanol de 15 h à 18 h.
Le matériel a été maintenu dans de la butyparaffine jusqu’au lendemain à 8 h.
➤ 1er bain de paraffine de 8 h à 12 h ;
➤ 2ème bain de paraffine de 12 h à 15 h ;
➤ 3ème bain de paraffine de 15 h à 18 h.
La mise en bloc s’est faite immédiatement après le 3ème bain de paraffine dans des «barres de Leuckart» posées sur une plaque de verre. La paraffine, neuve et préalablement filtrée, est d’abord versée dans le moule. Après formation d’une fine pellicule de paraffine au contact du moule, le matériel est mis à son tour dans le moule et orienté. Pour une meilleure adhésion du matériel au milieu d’inclusion, la paraffine qui l’entoure a été réchauffée. Les blocs sont ensuite étiquetés puis refroidis. Des coupes de 5 à 7 µm d’épaisseur sont réalisées deux à trois jours après la mise en bloc, au moyen d’un microtome à paraffine de type Minot. Elles ont ensuite été étalées et collées à l’albumine sur des lames nettoyées à l’alcool à 95°. Le séchage s’est fait à l’étuve à paraffine à 60°C. Les lames préalablement chauffées ont été colorées suivant la technique du Trichrome de Masson :
• déparaffinage, hydratation et coloration :
➤ 1er bain de toluène pendant cinq minutes ;
➤ 2ème bain de toluène pendant cinq minutes ;
➤ 1er bain de butanol pendant cinq minutes ;
➤ 2ème bain de butanol pendant cinq minutes ;
➤ un bain d’alcool à 95° pendant cinq minutes ;
➤ un bain d’alcool à 70° pendant cinq minutes ;
➤ lavage à l’eau courante pendant cinq minutes ;
➤ coloration à l’hématoxyline de Groat pendant deux à cinq minutes ;
➤ lavage à l’eau distillée pendant cinq minutes ;
➤ coloration à la Fushine-acide-ponceau pendant cinq minutes ;
➤ lavage à l’eau acétique ;
➤ coloration à l’orangé G molybdique pendant cinq minutes ;
➤ lavage à l’eau acétique ;
➤ coloration au vert lumière acétique ;
➤ lavage à l’eau acétique.
• déshydratation et montage
➤ un bain d’alcool à 70° pendant cinq minutes ;
➤ un bain d’alcool à 95° pendant cinq minutes ;
➤ 1er bain de butanol pendant cinq minutes ;
➤ 2ème bain de butanol pendant cinq minutes ;
➤ 1er bain de toluène pendant cinq minutes ;
➤ 2ème bain de toluène pendant cinq minutes.
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Table des matières
I. INTRODUCTION
II. MATERIELS ET METHODES
II.1. Présentation du milieu
II.1.1. Hydrographie
II.1.2. Climat
II.1.3. Populations humaines
II.2. Echantillonnage du matériel biologique
II.3. Achat et conditionnement des poissons
II.4. Identification et dissection des poissons
II.4.1. Caractéristiques des Mugilidae
II.4.2. Dissection des poissons
II.5. Recherche et étude morphologique des Nématodes
II.5.1. Recherche des nématodes
II.5.2. Etude morphologique des Nématodes
II.5.3. Etude histologique
II.6. Logiciels de traitement et d’analyse de données utilisés
III. RESULTATS ET DISCUSSION
III.1. Etude morphologique des Nématodes
III.1.1. Description des adultes de Cucullanus n. sp
III.1.1.1. Caractères généraux
III.1.1.2. Discussion
III.1.2. Description des stades larvaires
III.1.2.1. Anisakis sp
III.1.2.1.1. Caractères généraux
III.1.2.1.2. Mensurations des larves d’Anisakis sp
III.1.2.1.3. Etude histologique
III.1.2.1.3.1. Le rein
III.1.2.1.3.2. Le foie
III.1.2.1.4. Discussion
III. 1.2.2. Contracaecum sp
III.1.2.2.1. Caractères généraux
III.1.2.2.2. Mensurations des larves de Contracaecum sp
III.1.2.2.3. Etude histologique
III.1.2.2.3.1. Les ovaires
III.1.2.2.3.2. Le mésentère
III.1.2.2.3. Discussion
III.3. Etude des Relations Hôte – Parasite
III.3.1. Comparaison du parasitisme des différents organes par hôte
III.3.2. Etude du parasitisme par organe chez différents hôtes
III.3.3. Etude du rapport entre le parasitisme et le sexe de l’hôte
III.3.4. Etude du rapport entre le parasitisme et le poids de l hôte
III.3.5. Discussion
IV. CONCLUSION GENERALE ET PERSPECTIVES
V. RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
